做pcr,如何确定最佳退火及延伸的时间和温度?

做pcr,如何确定最佳退火及延伸的时间和温度? 如何确定pcr反应中的退火温度和延长时间 如何确定PCR反应中的退火温度和延长时间? PCR反应的循环前和循环后的温度和时间做pcr除了必要的变性,退火,延伸的温度和时间,还需要在循环之前设定一个温度和时间,循环完成之后也要设定个温度和时间,最后还有个保存的时间,我想 PCR在 变性、退火、延伸循环外,为什么还要先进行预变性和总延伸?作用原理及目的分别是什么如题 关于pcr体系及反应过程请问各位前辈:pcr体系配好后,不清楚退火温度,不马上进行反应,该怎么储藏退火温度 时间延伸时间由什么来决定? ISSR-PCR引物的退火温度问题我做ISSR-PCR引物的退火温度能不能直接使用primer5.0这个软件计算得出的退火温度.理论上来说这是最佳的退火温度吗? PCR退火的时间与什么有关 pcr退火温度怎么确定? pcr退火温度怎么确定 做荧光定量PCR和半定量PCR有什么区别?半定量的PCR退火温度和荧光定量PCR是一样的吗? 在做RT-PCR时,或者是一般的PCR时,退火温度怎么设置,退火温度和Tm值之间有怎么样的关系? 随机pcr目的片段10000以上,延伸时间多少比较合适?普通taq,延伸能力是不是不太理想?另外退火温度较高,64度,也是不出条带的原因吗? 如何用PCR技术检测酵母菌?如何选择引物?变性、退火、延伸的温度设置为多少比较合适,Buffer?如何用PCR技术检测酵母菌?如何选择引物?变性、退火、延伸的温度设置为多少比较合适,Buffer具体规 PCR时的退火时间长短对整个PCR 过程及结果有什么影响么?与DNA片段的长短有关系么？ 如何利用梯度PCR测定退火温度?怎样测定的? PCR变性温度是多少?退火、延伸、复性分别是多少? 关于PCR的问题?问一个,PCR在变性,退火,延伸的循环前后各有一个单独的94度5分钟,72度5分钟,这两个是做什么用的,如果不加行不行?