PCR阴性对照始终有条带上一次PCR的阴性对照跑出来一条带.而且跟我的目标片段位置目测是一样的.我的片段大小加上两段引物,长度是160BP.大家都说是加错样了或者污染了.昨天特意到超净台里

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/18 13:07:07
PCR阴性对照始终有条带上一次PCR的阴性对照跑出来一条带.而且跟我的目标片段位置目测是一样的.我的片段大小加上两段引物,长度是160BP.大家都说是加错样了或者污染了.昨天特意到超净台里PCR阴性对

PCR阴性对照始终有条带上一次PCR的阴性对照跑出来一条带.而且跟我的目标片段位置目测是一样的.我的片段大小加上两段引物,长度是160BP.大家都说是加错样了或者污染了.昨天特意到超净台里
PCR阴性对照始终有条带
上一次PCR的阴性对照跑出来一条带.而且跟我的目标片段位置目测是一样的.我的片段大小加上两段引物,长度是160BP.
大家都说是加错样了或者污染了.昨天特意到超净台里重新做了一次.仍然是这样.我要疯了.为什么.是不是我的无菌水有问题.我本周刚灭的菌啊.
我说的阴性对照是指不加模板 加水的。。
刚百度了一下发现有人说的阴性对照好像和我指的不是一个意思。。

PCR阴性对照始终有条带上一次PCR的阴性对照跑出来一条带.而且跟我的目标片段位置目测是一样的.我的片段大小加上两段引物,长度是160BP.大家都说是加错样了或者污染了.昨天特意到超净台里
明白你的意思,你这个阴性对照出现目的条带,一个原因:就是你的PCR体系中任一一个试剂被模板污染了,把把PCR的试剂全部换新,重新来试,明白了吗
我也遇到过这样的问题

要么是无菌水污染了 不过我更觉得是你的目的片段太短了 那个条带只是引物聚体 你可以再多跑一会看能不能跑开 还有就是你P目的片段后有没有测序确定你扩增出来了 这么短的 说不定你目测的什么目的片段也只是引物聚体而已目的片段没有错。测序过。是用于荧光定量的。所以必须小。 引物聚体不会在这个位置上吧。都已经接近200的位置了。所以让你再跑一会啊 毕竟marker的浓度是很大的 要不然还有什么可能呢 什么...

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要么是无菌水污染了 不过我更觉得是你的目的片段太短了 那个条带只是引物聚体 你可以再多跑一会看能不能跑开 还有就是你P目的片段后有没有测序确定你扩增出来了 这么短的 说不定你目测的什么目的片段也只是引物聚体而已

收起

不仅仅怀疑水的问题,也有可能模板混进了引物里,或是buffer里,dNTP里,都有可能,最好就是全部都换新的,试一试。
省时省气省钱!不要试图去寻找哪个样品污染了,那是浪费时间力气金钱!

PCR阴性对照始终有条带上一次PCR的阴性对照跑出来一条带.而且跟我的目标片段位置目测是一样的.我的片段大小加上两段引物,长度是160BP.大家都说是加错样了或者污染了.昨天特意到超净台里 怎样设置PCR的阳性对照和阴性对照 单引物PCR对照的原理为什么有时候做PCR要做单引物扩增对照?和阴性对照的差异是什么?有什么意义?单引物扩增有条带和没条带分别说明啥?应该要怎样才是对的?我做了一次PCR..单引物双引物和 巢式PCR扩增阴性对照有非特异性扩增第一泳道:第一轮扩增的阳性对照、 第二泳道:阴性对照第三泳道:marker、 第四、五泳道:第二轮扩增的阳性对照第六泳道:用第一轮扩增的阴性对照 生物PCR阴性对照实验什么是阳性与阴性?有什么区别?阴性不能添加模板.为什么?PCR还有什么注意点? 定量RT-PCR需要设置不同的阳性和阴性对照,这是为什么? 荧光定量PCR 阴性对照曲线上扬为什么 结核杆菌pcr阴性是什么意思 巢式PCR,阴性对照出现非特异性扩增问题第一泳道:第一轮扩增的阳性对照、 第二泳道:阴性对照第三泳道:marker、 第四、五泳道:第二轮扩增的阳性对照第六泳道:用第一轮扩增的阴性对 我最近做PCR,目的条带是321bp,但是我扩出来的阴性对照都有条带,而且和样本条带扩出来的一样我级别太低,没办法上传图片,我用的是PCR Master Mix,两种不同厂家的做出来的阴性对照都有条带 pcr扩增,这张DNA琼脂糖电泳图怎么了?从左往右:A样本、B样本、阴性对照的beta actin;A样本、B样本、阴性对照的gene1;样本、阴性对照的gene2. 反转录中的阳性对照是怎么回事,还有PCR中的阴性对照又是怎么回事? 荧光pcr阴性对照也有峰,怎么了?我最近跑荧光pcr,跑了好几次,阴性对照都有峰,但不知是什么原因,是不是引物或水被污染,我想请问一下路过的大侠,做荧光时需要注意什么啊,实验操作时需要有 pcr 阴性对照孔32个循环开始出现扩增怎么回事 在PCR扩增的条带上,如何看出哪个位点是多态位点?多态位点和等位基因是什么关系? PCR产物的酶切问题我用的PCR-RFLP法分析SNP:我的PCR产物有条带,可是我做酶切之后还是那条PCR产物的条带做了好几板都这样.病例和对照全做了,最后都没有切开的条带,这是怎么回事?十分感激. 怎么把微滴式数字pcr的阴性基础荧光降低 各位同仁,我做的SYBR GREEN实时定量PCR,怎么阴性对照总是出来Ct值呢,我的阴性对照是用灭菌水做模板的