我最近做PCR,目的条带是321bp,但是我扩出来的阴性对照都有条带,而且和样本条带扩出来的一样我级别太低,没办法上传图片,我用的是PCR Master Mix,两种不同厂家的做出来的阴性对照都有条带

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/24 01:04:27
我最近做PCR,目的条带是321bp,但是我扩出来的阴性对照都有条带,而且和样本条带扩出来的一样我级别太低,没办法上传图片,我用的是PCRMasterMix,两种不同厂家的做出来的阴性对照都有条带我最

我最近做PCR,目的条带是321bp,但是我扩出来的阴性对照都有条带,而且和样本条带扩出来的一样我级别太低,没办法上传图片,我用的是PCR Master Mix,两种不同厂家的做出来的阴性对照都有条带
我最近做PCR,目的条带是321bp,但是我扩出来的阴性对照都有条带,而且和样本条带扩出来的一样
我级别太低,没办法上传图片,我用的是PCR Master Mix,两种不同厂家的做出来的阴性对照都有条带

我最近做PCR,目的条带是321bp,但是我扩出来的阴性对照都有条带,而且和样本条带扩出来的一样我级别太低,没办法上传图片,我用的是PCR Master Mix,两种不同厂家的做出来的阴性对照都有条带
最大的可能就是污染了呗,PCR配体系与加模板时都要戴口罩手套,外加最好不要再你们常做实验的地方加这些东西,空气中极有可能有相应模板气溶胶存在.

目的条带短,可能是产生了引物二聚体

应该是污染导致的,提DNA的时候是不是污染了

我最近做PCR,目的条带是321bp,但是我扩出来的阴性对照都有条带,而且和样本条带扩出来的一样我级别太低,没办法上传图片,我用的是PCR Master Mix,两种不同厂家的做出来的阴性对照都有条带 关于转基因植株检测的问题我做的是大豆转基因,最近做检测,用328bp的引物做PCR时质粒很正常,可是基因组在328bp左右没有出现条带,而在700bp出现很亮的条带;用35S引物PCR,在目的条带那 pcr 条件我做了IGF-1基因5'调制区的,按照别人发的文章条件跑的PCR,自己又优化了条件,结果PCR产物经检测,有目的条带,但好像在100bp下面有一条条带,我怀疑是引物二聚体.请问各位有什么办法能 我做的实验是提取总的RNA,然后反转录,再PCR,最后出来的结果是这样的见图,我的目的条带为500bp我的条带为一片,没有特意性的 我做转基因植物,最近一直做PCR鉴定,但只有引物二聚体,原因会有哪些?转同样的基因,在转基因烟草的PCR鉴定时,能P出目的条带,而且我用的是相同的条件来做我的却得不到结果.会不会和物种有 pcr杂带在目的条带之上.以前有做过同样的程序,同样的引物和酶.p细菌时,若1492r/27f,则在大于1500bp处有杂带,但比目的条带弱.用357fgc和518r时,则在400bp左右有杂带,而200bp的目的条带也不亮.消除杂 RT-PCR产物电泳结果只有引物二聚体,没有目的条带,更换引物了也这样,最近2个月反复做PCR跑电泳一直都是只有引物二聚体没有目的条带,我的PCR条件是这样的模板1ul (浓度100ng)引物上下游各1u RT-PCR产物电泳结果只有引物二聚体,没有目的条带,更换引物了也这样,最近2个月反复做PCR跑电泳一直都是只有引物二聚体没有目的条带,我的PCR条件是这样的模板1ul (浓度100ng)引物上下游各1u PCR产物为什么会出现100~200bp的条带我用菌落PCR检测library质粒扩增质量,引物用的是takara的M13正反引物,目的质粒基因长度为~500bp.PCR完后电泳图谱显示~750bp有较明显条带,很奇怪的就是100~200bp有 PCR无法P出目的条带最近在做PCR,提取的基因组为模板,基因组序列上从NCBI上找的,没有错.但是无论如何换引物和PCR条件,都会得到一条比目的片段大500bp左右的亮条带.(引物换了很多对儿,卡的 用pet32a构建表达载体,目的片段是220bp左右,酶切是ecor1和hindlll,但酶切连接转菌提质粒后却只有2000bp做过pcr验证有目的条带,想不明白是为什么.2个月了,求救 sscp怎么辨别目的条带和非目的条带我做PCR-sscp,银染之后发现有很多条带,但不知道哪个才是目的条带变性后的结果,有一种条带比较亮,下面还有不是很亮的,而且好像有多态. 胶回收:雀式pcr第一对pcr引物扩增后 ,产物电泳得到两条带,那么我该切哪一条啊?怎么知道目的片段的bp?不是目的片段的bp,图片中左边第一条是marker,第五第六条各有两条带,在1000 和1400的 [求助] PCR产物条带很淡最近做的PCR一直条带很淡,已经调了一些条件,还是没有效果. 目前是这样的:目的片段大约2.5kb,退火温度55度,从电泳的结果看来目的条带很整齐,也没有非特异性扩增, 单克隆验证,菌液PCR有目的条带的位置,但是质粒PCR后,却没有批出我的目的条带这是为什么呀 高保真酶PCR没有结果我用高保真酶做PCR的时候没有目的条带,但是同样的条件下用Taq酶条带就很亮,这是为什么呢? 菌液PCR不同条带将已扩增出来的993bp的cDNA与T载体连接,之后DH5α转化,涂平板,挑克隆!菌液PCR为何一组检测到750bp有条带,一组1000bp处有条带两种结果!1000bp条带处是我预期的条带!麻烦大师留下相 PCR结果没有条带,都是弥散的,这是为什么前几次做的结果都挺好的,条带很清楚,亮度也可以,就是不太齐,但是最近几次几乎没有目的带,都是弥散的,从头到尾,我用的东西都是一样的,条件也没变