PCR结果没有条带,都是弥散的,这是为什么前几次做的结果都挺好的,条带很清楚,亮度也可以,就是不太齐,但是最近几次几乎没有目的带,都是弥散的,从头到尾,我用的东西都是一样的,条件也没变
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/24 07:45:48
PCR结果没有条带,都是弥散的,这是为什么前几次做的结果都挺好的,条带很清楚,亮度也可以,就是不太齐,但是最近几次几乎没有目的带,都是弥散的,从头到尾,我用的东西都是一样的,条件也没变PCR结果没有条
PCR结果没有条带,都是弥散的,这是为什么前几次做的结果都挺好的,条带很清楚,亮度也可以,就是不太齐,但是最近几次几乎没有目的带,都是弥散的,从头到尾,我用的东西都是一样的,条件也没变
PCR结果没有条带,都是弥散的,这是为什么
前几次做的结果都挺好的,条带很清楚,亮度也可以,就是不太齐,但是最近几次几乎没有目的带,都是弥散的,从头到尾,我用的东西都是一样的,条件也没变,但是就是跑不出来,这是为什么?mark跑得很好,应该不是电泳的问题,
PCR结果没有条带,都是弥散的,这是为什么前几次做的结果都挺好的,条带很清楚,亮度也可以,就是不太齐,但是最近几次几乎没有目的带,都是弥散的,从头到尾,我用的东西都是一样的,条件也没变
首先怀疑,特异性不好,解决办法:
1,可能是模板量过高,降低模板浓度10-1000倍;
2,适当提高退火温度1-3度,或者先用高于你以往退火温度的1-3度先p上5个循环,再用先前温度p剩余的循环(也就是在程序中多设置2步);
3,稍降Mg离子浓度,如果以前加1.5ul的,试试1-1.2ul;
如果以上方案还不能解决,就要检查你的模板、引物和taq,重新提模板、重新稀释引物,以及用新的pcr试剂.
欢迎继续讨论,纯属手打,祝实验顺利!
Taq酶的问题可能性最大,也有可能是引物接触了RNA酶被降解了。
最好把你的pcr体系要加的都换一下,如果以前做的挺好,模板应该还好。
PCR结果没有条带,都是弥散的,这是为什么前几次做的结果都挺好的,条带很清楚,亮度也可以,就是不太齐,但是最近几次几乎没有目的带,都是弥散的,从头到尾,我用的东西都是一样的,条件也没变
我的PCR条带弥散,阴性对照也弥散,但是不加引物不弥散,当然也没有条带,请问都是什么原因啊?
您好.我最近的PCR扩的产物成弥散状,但是能看见目的条带,这是怎么回事啊,我之前试条件时都没有弥散这样的产物酶切能切吗?
PCR后电泳结果所得目标条带为什么位置会与Marker发生较大偏差?右图为正常目标扩增条带与Marker的相对位置,而左图的目标条带位置很奇怪,PCR体系都是一样的,唯一不同的是电压相差20V,但为什
PCR结果失败原因分析我做的PCR一直都没有条带,不仅仅是目的条带,杂带也没有.温度,体系,模板都换了好几次,结果都是一样.我想知道这是怎么回事.我个人怀疑是引物或模板的问题,引物不好也
pcr结果出不来,每次都是只有100bp以下的条带,没有其他的条带不管是扩gapdh,还是目的基因,都是只在100bpmarker下有一个条带,其他地方没有任何条带,扩的gapdh应该在200bp左右,RNA纯度分析每次结果
非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后出现很多弥散的条带是PCR的原因还是电泳的原因呢?
高保真酶PCR没有结果我用高保真酶做PCR的时候没有目的条带,但是同样的条件下用Taq酶条带就很亮,这是为什么呢?
PCR产物电泳检测结果点样孔很亮,没有目的条带.是什么原因?marker的条带正常.
RT-PCR产物电泳结果只有引物二聚体,没有目的条带,更换引物了也这样,最近2个月反复做PCR跑电泳一直都是只有引物二聚体没有目的条带,我的PCR条件是这样的模板1ul (浓度100ng)引物上下游各1u
RT-PCR产物电泳结果只有引物二聚体,没有目的条带,更换引物了也这样,最近2个月反复做PCR跑电泳一直都是只有引物二聚体没有目的条带,我的PCR条件是这样的模板1ul (浓度100ng)引物上下游各1u
请问若因为非特异扩增导致PCR产物弥散,理论上弥散带里是否应该包含目的条带?谢谢TT-TTPCR产物电泳弥散,因为退火温度为55,所以初步考虑是退火过低导致的非特异扩增.但小女子有一疑问,我的
我构建的穿梭载体,连接好后进行双酶切和PCR两个途径的检测,结果酶切没有条带显示,而PCR确有目的条带!这是为神马?只连这个穿梭载体就已经连了两个月了,我快崩溃了!
DNA胶回收电泳有目的条带,但是测OD值时去测不出来?请问这究竟是什么原因?菌落PCR之后进行胶回收的!亮的两条带是回收之前,其他都是回收之后电泳结果.
PCR跑出来的条带比较弥散,主要有哪些原因啊?
单克隆验证,菌液PCR有目的条带的位置,但是质粒PCR后,却没有批出我的目的条带这是为什么呀
全基因组DNA双酶切,没有弥散条带或者条带异常全基因组DNA双酶切(HpaⅡ和EcoRⅠ、MspⅠ和EcoRⅠ,110V琼脂糖电泳没有弥散条带,加大DNA的量酶切后,条带异常和从前不同.酶切产物连接完,做PCR扩增
做PCR以后,跑电泳.结果一条带都没有,为什么我们做的是RT—PCR,用的是琼脂糖凝胶电泳