PCR延伸时间为2min结果设成一分钟有什么影响?

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/25 01:08:11
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PCR延伸时间为2min结果设成一分钟有什么影响?
PCR延伸时间为2min结果设成一分钟有什么影响?

PCR延伸时间为2min结果设成一分钟有什么影响?
延伸时间取决于目的DNA片段的长度和所用聚合酶的催化效率.要确保聚合酶在该时间内完成目的片段新核苷酸链的合成.
打个比方,若你的目的片段长度为~2000bp,所用的Taq酶的催化效率是1200bp/min,那么延伸时间2min足够了,但1min是不够的.

PCR延伸时间为2min结果设成一分钟有什么影响? PCR 电泳 没有条带RNA 反转录后 PCR 引物为一段T的锚定引物 和一段随机引物 94℃ 5min;94℃变性 30s,40℃退火 2min,72℃延伸 1min,40个循环; 72℃补平 5min.1%琼脂糖凝胶电泳 看不到条带,点样空是亮 PCR延伸时间不够或者过长会怎么样 PCR复性温度如何确定为什么要在最后延伸10min?是否有非特异性扩增产物(或引物二聚体),如何消除? pcr循环停留时间过长会有什么影响我在跑PCR的时候要跑35个循环,循环条件是:98℃15s、60℃1min、72℃1min,我在60℃的时候程序设错了,在60℃保温了25min才开始1分钟的倒计时,想知道这样会对我跑 做PCR反应为什么在循环结束后要有5min延伸反应?是指整体35次循环结束后的5min延伸反应 PCR一定循环数之后有一步5或10分钟的延伸,它有什么作用?什么情况下可以省略? 关于PCR的问题?问一个,PCR在变性,退火,延伸的循环前后各有一个单独的94度5分钟,72度5分钟,这两个是做什么用的,如果不加行不行? 做pcr时最后保存4度的时间应该以多少为宜?程序设定是10分钟,我在做PCR时由于赶时间,十分钟还没有到就结束了PCR过程,请问会影响到结果吗? 做pcr,如何确定最佳退火及延伸的时间和温度? 3400bp的基因PCR时怎样设定程序,尤其是延伸的时间?求指教 PCR 实验时逆转录时间少了10分钟会有什么影响 时间单位-min是分钟吗? PCR时的退火时间长短对整个PCR 过程及结果有什么影响么?与DNA片段的长短有关系么? 请问有没有高手知道tail pcr 中25℃三分钟之后ramping to 72℃ over 3min 如何设置? 有谁知道怎么设计PCR程序,如何选用酶,不同酶的延伸温度是多少? 帮我看看pcr反应条件在文献上看了两个条件:1、预变性94度5分钟,变性94度1分钟,67度退火1分钟,72度延伸1分钟,72度7分钟,30个循环;2、预变性95度2分钟,变性94度30秒,67度退火1分钟,72度延伸45秒,7 跪求高手指点一下,为什么我的PCR产物电泳图这个样子.引物是通用引物27F和1492r体系25ul,buffer:2.5,dntp:2,引物:0.5,模板0.5,taq酶天根的(5U)0.2ul预变性94℃,4min变性94℃,40s退火56℃,1min延伸72℃,1