pcr扩增出的片断正确但双酶切结果却偏大,不只是为什么?请高手指点?我的酶切底物是构建好的质粒载体。原来还酶切的正确但自从转菌之后再提取质粒去酶切缺偏大。

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/11/28 11:21:29
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pcr扩增出的片断正确但双酶切结果却偏大,不只是为什么?请高手指点?
我的酶切底物是构建好的质粒载体。原来还酶切的正确但自从转菌之后再提取质粒去酶切缺偏大。

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可能是质粒在转菌后部分碱基出现错配或者突变导致你酶切的位置发生变化.因为你pcr扩增只是你引物的位置只要不突变就可以正常扩增.建议你做个测序.

你的酶切底物是什么?是质粒还是你说的PCR产物?

pcr扩增出的片断正确但双酶切结果却偏大,不只是为什么?请高手指点?我的酶切底物是构建好的质粒载体。原来还酶切的正确但自从转菌之后再提取质粒去酶切缺偏大。 提取血清细胞因子DNA,用pcr对细胞因子作用的调控元件扩增,酶切作用的相应片断,可是切完之后应该怎样进 利用PCR如何扩增出准确的DNA片段 基因的PCR扩增实验扩增不出DNA条带是什么原因? 关于PCR扩增技术的 是否是引物二聚体我需要扩增出300bp左右的片断,用2%的琼脂糖凝胶90V电压下电泳30分钟后,根据marker出现了大约300bp的扩增片断,但在它前面隐约有一条较宽的条带,很淡但能看清是一条带.这是否 对PCR扩增的产物进行酶切的方法? PCR扩增时,引物与模板配对到什么程度就可以扩出目标片断?不考虑其他因素.请给详细专业的回答我的意思,是不是引物比如说25bp ,要与模板完全配对才可以扩增,还是可以有一个或几个不匹配 如何对PCR扩增的产物进行酶切? 如何对PCR扩增的产物进行酶切? PCR技术如何获取目的基因呢,另外PCR的过程为什么会扩增出不同长度的链 pcr为什么要扩增,PCR的目的是获得目的基因片段?但为什么要扩增很多次呢,小菜题不懂.为什么要大量呢 PCR的扩增产物是什么 是如何扩增出来的 基因的PCR扩增出现非特异扩增产物,何故? 英语翻译本文通过PCR、转化、提质粒、酶切、连主要接、纯化等步骤构建了质粒pET28a-NULP1.先通过PCR扩增出了nulp1,并将nulp1连接入pMD18-T载体酶切检测并测序,得到正确的nulp1,再将nulp1连接到pET-28 PCR的扩增基因的引物是什么 酶切后PCR一条带都没有 但原质粒PCR有条带 为什么做MUCIN基因 从扩增、 切胶纯化、 加A 、T载体链接、 转入感受态 到挑克隆鉴定出阳性克隆 最后提质粒 取一部分提出的质粒双酶切 质粒与酶 什么是PCR技术的非特异性扩增?