英语翻译本文通过PCR、转化、提质粒、酶切、连主要接、纯化等步骤构建了质粒pET28a-NULP1.先通过PCR扩增出了nulp1,并将nulp1连接入pMD18-T载体酶切检测并测序,得到正确的nulp1,再将nulp1连接到pET-28

来源：学生作业帮助网编辑：六六作业网时间：2024/11/15 23:41:41

英语翻译本文通过PCR、转化、提质粒、酶切、连主要接、纯化等步骤构建了质粒pET28a-NULP1.先通过PCR扩增出了nulp1,并将nulp1连接入pMD18-T载体酶切检测并测序,得到正确的nu

英语翻译本文通过PCR、转化、提质粒、酶切、连主要接、纯化等步骤构建了质粒pET28a-NULP1.先通过PCR扩增出了nulp1,并将nulp1连接入pMD18-T载体酶切检测并测序,得到正确的nulp1,再将nulp1连接到pET-28
英语翻译
本文通过PCR、转化、提质粒、酶切、连主要接、纯化等步骤构建了质粒pET28a-NULP1.先通过PCR扩增出了nulp1,并将nulp1连接入pMD18-T载体酶切检测并测序,得到正确的nulp1,再将nulp1连接到pET-28a载体,成功构建了pET-28a-NULP1重组质粒.
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英语翻译本文通过PCR、转化、提质粒、酶切、连主要接、纯化等步骤构建了质粒pET28a-NULP1.先通过PCR扩增出了nulp1,并将nulp1连接入pMD18-T载体酶切检测并测序,得到正确的nulp1,再将nulp1连接到pET-28
This aritcle through the steps such as PCR,transformation,distilling plasmid,EcoRI,connecting main links,purification and so on,in order to built the plasmid pET28a-NULP1.First,amplifing the nulp1 through PCR,and connecting the nulp1 to the carrier EcoRI pMD18-T then testing and sequencing,when you got the correct nulp1,then connecting nulp1 to carrier pET-28a,built the regrouping plasmid pET-28a-NULP1 successfully.

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本文通过PCR、转化、提质粒、酶切、连主要接、纯化等步骤构建了质粒pET28a-NULP1。先通过PCR扩增出了nulp1，并将nulp1连接入pMD18-T载体酶切检测并测序，得到正确的nulp1，再将nulp1连接到pET-28a载体，成功构建了pET-28a-NULP1重组质粒。
In this paper, PCR, transformation, reference plasmid, digestion, even the main access, purification steps, such as the construction of plasmid pET28a-NULP1. First PCR amplified through nulp1, and connect nulp1 into pMD18-T vector and sequenced enzyme detection, the correct nulp1, and then connect to nulp1 vector pET-28a, was successfully constructed pET-28a-NULP1 the reorganization of the quality tablets.

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英语翻译本文通过PCR、转化、提质粒、酶切、连主要接、纯化等步骤构建了质粒pET28a-NULP1.先通过PCR扩增出了nulp1,并将nulp1连接入pMD18-T载体酶切检测并测序,得到正确的nulp1,再将nulp1连接到pET-28 为什么我的目的基因连接克隆载体转化、提质粒后,酶切鉴定正确,而质粒PCR和菌液PCR鉴定都不正确呢?着急加点 kml?但是我转化后菌落长的还可以啊.酶切目的带在1000左右,质粒PCR在750左右了为什么每次做转化后菌落PCR有带,但是提质粒后就P不出. 如果PCR产物可以直接用来测序,但为什么还需要买PCR产物纯化试剂盒,还要进行连接转化提质粒酶切?我的实验是在PCR产物电泳后发现有自己所需要的长度的目的片段.如果直接测序和经过连接转 PCR产物TA克隆,PGEM-T 载体+目的片段,那么转化挑克隆提取的质粒片段是多大?PCR产物TA克隆,PGEM-T 载体的序列是大约3000bp,PCR产物的目的片段是450bp,那么：经过连接、转化后挑单克隆,提取质粒,提提完质粒后需要做什么工作?是跑琼脂糖电泳还是做PCR检测?PCR检测和酶切检测各指的什么? 酶切后PCR一条带都没有但原质粒PCR有条带为什么做MUCIN基因从扩增、切胶纯化、加A 、T载体链接、转入感受态到挑克隆鉴定出阳性克隆最后提质粒取一部分提出的质粒双酶切质粒与酶在含卡那的培养板和培养基中都长,菌液PCR也有,就是提不出来质粒用pET30a构建原核表达载体,连接产物转化,长了满板,条单克隆到含卡那的液体培养基中,长了,菌液PCR有条带,但提质粒提不出来我的片段转入ppicza载体后转化到DH5a里,菌落PCR验证成功,为何就是提不出质粒? 转化后菌液pcr有目的条带,然后提质粒和双酶切验证.但是没有得到目的条带.1.提质粒最后一步用的是elution buffer而不是水，这样有什么影响，如果有影响，现在如何补救？2.28a空质粒的位置应通过16srDNA鉴定细菌的疑惑1、为什么不能把PCR所得溶液直接用来测序,是测序技术的限制么?提供给测序公司的应该是转化阳性的菌液,还是提取出来的质粒?2、pcr产物跑胶后要胶回收再做载体连问个很菜的问题：在跑完pcr以后目的基因已经扩增了很多了,然后再切胶纯化后应该就可以用来去测序了,为什么还要进行后面的连接转化重组质粒的抽提和酶切鉴定啊,他们有什么意义? （鉴定质粒表达）比较菌落PCR和提质粒酶切这两种方法的优缺点,为什么需要两次鉴定? 菌落PCR有带,可提取的质粒没带!请问我转化的单菌落做菌落PCR有带,单相对应的菌落提取质粒P不出带是什么原因呀?引物是特异性的! 转化后的重组子进行PCR,扩增出来的是目的基因还是整个质粒?为什么DNA测序是在转化后才进行? 转化的感受态有氨苄抗性但是提不出来质粒? 如何验证载体质粒的酶切位点已被切开?PCR产物（目的基因）被酶切开? PCR产物和质粒双酶切后电泳如何判断酶切完成?