我对载体进行切胶回收后,一部分酶切,结果正确,另一部份做转化,但是失败了.请问这有可能是什么原因阿,怎么解决呢

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/11/19 03:17:51
我对载体进行切胶回收后,一部分酶切,结果正确,另一部份做转化,但是失败了.请问这有可能是什么原因阿,怎么解决呢我对载体进行切胶回收后,一部分酶切,结果正确,另一部份做转化,但是失败了.请问这有可能是什

我对载体进行切胶回收后,一部分酶切,结果正确,另一部份做转化,但是失败了.请问这有可能是什么原因阿,怎么解决呢
我对载体进行切胶回收后,一部分酶切,结果正确,另一部份做转化,但是失败了.
请问这有可能是什么原因阿,怎么解决呢

我对载体进行切胶回收后,一部分酶切,结果正确,另一部份做转化,但是失败了.请问这有可能是什么原因阿,怎么解决呢
载体不是没必要作回收吗?
不是空载体吧?空载体怎么还酶切结果正确呢?如果不是空载体,确定插入为点是你预定的位点吗?不是插抗性基因里了吧?
酶切与转化的时间间隔多长?会不会转化时已经降解了?
最可能的还是感受态的问题,或者转化的操作.
就知道这些,才疏.

空质粒转化吗?应该有很高的转化率啊。可能感受态细胞的状态不好吧。

我对载体进行切胶回收后,一部分酶切,结果正确,另一部份做转化,但是失败了.请问这有可能是什么原因阿,怎么解决呢 我构建的穿梭载体,连接好后进行双酶切和PCR两个途径的检测,结果酶切没有条带显示,而PCR确有目的条带!这是为神马?只连这个穿梭载体就已经连了两个月了,我快崩溃了! T载体连接问题现在在做5,RACE.扩增出目的条带后胶回收,然后用特异性引物去嵌套验证,结果也有目的大小的条带扩增出来,这应该可以说明胶回收的目的片段是正确的.但是用T载体连接后转化到 我把一段140碱基的片段和载体GFP.c1酶连后,然后酶切跑电泳,条带上有140的条带,结果测序结果为空载体请问这是为什么啊? 天根的DNA纯化回收试剂盒怎么样我切胶回收DNA,回收效率都不好 甲醇-醋酸回收用甲醇-醋酸溶剂对中药葛根素进行重结晶后,如何回收甲醇-醋酸? 本人菜鸟 想问核酸电泳完成后为什么要进行切胶回收?要是没有跑出来为什么也要回收? 同样序列,测序之后,发现不同我PCR出一个条带,胶回收后拿去测序,一共测了两次,结果都发现找不到引物,然后用这两次测序结果进行对比,发现根本不是同一个序列.我想请问一下,这是因为我克 您好!目的基因跟载体片段连接后成重组质粒,那里面的那些溶液会影响接下来的酶切鉴定吗就是把目的基因和载体片段连接起来的那个连接体系里面的溶液,我接下来要坐酶切鉴定,会对其有影 制粒机如何对塑料瓶进行回收呢 如果胶回收后的质粒的浓度,在正常范围内,那么是不是说明我质粒酶切完全了? DNA酶切之后,产物直接电泳,胶回收之后的产物中酶还有活性吗?没有用EDTA终止反应,电泳和胶回收会使酶失活吗?现在取胶回收产物进行连接转化,转化效率底,平板上未见菌落.怀疑是胶回收的载 oMEGA 胶回收好用吗听说回收的DNA会发生连接不上载体的情况, proe4.0组件下怎么对某个零件进行阵列proe4.0组件下怎么对某个零件进行阵列?我激活那个零件然后轴阵列结果只阵列了该零件的一部分,这是怎么回事? DNA胶回收电泳有目的条带,但是测OD值时去测不出来?请问这究竟是什么原因?菌落PCR之后进行胶回收的!亮的两条带是回收之前,其他都是回收之后电泳结果. 胶回收试剂盒干什么用我的胶已经跑好了,接下来要对某蛋白进行提取和鉴定,需要试剂盒做什么? PCR产物是单带,切胶回收纯化后,使用ABI3730进行测序,为什么测序没有反应呢?目的片段是120bp.我只是想知道为什么,至于解决方法,呵呵,我已经重新设计引物了。样本太多,一共200多个,建 Xho1和Nde1 50μl双酶切反应体系的配制?用Xho1和Nde1对载体质粒和目的片段分别进行双酶切,50μl的酶切体系应该怎样配制?我不知道每种试剂加多少好?(PS:反应体系中要用到BSA).