蛋白质测定的原理

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蛋白质测定的原理蛋白质测定的原理蛋白质测定的原理不同测试方法原理不一样,下面介绍一种常用的方法,凯氏定氮法的原理：凯氏定氮法测蛋白含量：根据凯氏定氮测得的氮含量和氮在蛋白质中的含量为1/6.25（即1

蛋白质测定的原理
蛋白质测定的原理

蛋白质测定的原理
不同测试方法原理不一样,下面介绍一种常用的方法,凯氏定氮法的原理：
凯氏定氮法测蛋白含量：
根据凯氏定氮测得的氮含量和氮在蛋白质中的含量为1/6.25（即16%）,故可计算得出蛋白质的含量.
凯氏定氮过程及化学反应如下：
浓硫酸在催化剂和高温作用下,将有机化合物消化,使其中的氮全部转换成硫酸铵,然后采用加碱（NaOH）蒸馏的方式,使硫酸铵中的铵（NH4+）以氨气的形式释放出来,再用加有指示剂的硼酸溶液吸收这些氨气,用酸滴定液滴定至终点,从而确定蛋白质中氮的含量.本方法创始人是丹麦化学家Johan Kjeldahl (1849-1900).其反应原理如下：
催化剂
消化：含氮有机物＋H2SO4 ――――→(NH4)2SO4
420℃
蒸馏：(NH4)2 SO4 + 2NaOH→2NH3 ↑+Na2SO4 +2H2O
吸收：NH3 + H3BO3 →NH4BO2 + H2O
滴定：2NH4BO2 + H2O +H2SO4→(NH4)2SO4 +2H3BO3

蛋白质含量测定方法比较本实验的目的是学会各种蛋白质含量的测定方法。了解各种测定方法的基本原理和优缺点。蛋白质含量测定法，是生物化学研究中最常用、最

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