最近拿镍柱做实验,可纯化不到His-tag融合蛋白,

来源：学生作业帮助网编辑：六六作业网时间：2024/12/23 18:42:56

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首先找一种正常的标签蛋白进行一下纯化试验,如果能够纯化出来那就是你的蛋白的问题,可能是蛋白在表达的时候非正常折叠,标签被折叠在内部,没有在蛋白表面游离着,这样的话当然不会被镍柱捕获了.比较严重的情况就是包涵体的形成,是否形成包涵体你可以根据蛋白的性质反应或者是电泳检测一下离心后的细胞破碎液上清和沉淀中目的蛋白的分布情况.如果形成包涵体那你就需要先使蛋白质尽可能的溶解了,可以加入一些变性剂,比如尿素.当标签暴露出来之后就比较容易挂柱了.

没有具体信息，就大致分析一下吧。
首先确定蛋白是否表达，是可溶蛋白还是包涵体。
然后看蛋白是否可以正常挂柱，正常洗脱。可以借点正常的His-tag融合蛋白或镍柱，帮助判断是蛋白还是柱子有问题。
最后就是对症下药了。一般说，柱子出问题的可能性较大，比如使用次数过多，已经都白了。。...

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没有具体信息，就大致分析一下吧。
首先确定蛋白是否表达，是可溶蛋白还是包涵体。
然后看蛋白是否可以正常挂柱，正常洗脱。可以借点正常的His-tag融合蛋白或镍柱，帮助判断是蛋白还是柱子有问题。
最后就是对症下药了。一般说，柱子出问题的可能性较大，比如使用次数过多，已经都白了。。

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最近拿镍柱做实验,可纯化不到His-tag融合蛋白, 如何把医用酒精纯化?想自己做一个提取草莓DNA的实验.现在只有75%的医用酒精.（老爸每天打胰岛素用的）怎么可以纯化到可提取DNA要求? 在纯化蛋白时,如何重复使用柱子及柱料?用his柱纯化的在纯化蛋白时,镍离子有什么作用?用His柱纯化的透析法纯化蛋白酶这个实验的具体过程为什么做聚沉实验的氢氧化铁溶胶必须渗析纯化设计一个实验来分离纯化苯酚降解细菌 , 求杏鲍菇多糖分离纯化的实验方案谁能告诉我TA的空间的背景音乐名称要原来的名字,TA上面写得名字搜不到关于蛋白纯化技术的专利问题.有没有哪位高手知道6-His纯化系统,GST纯化系统的专利号? 为什么用带HIS标签的镍柱纯化试剂盒纯化蛋白后包ELISA可以避免大肠杆菌的干扰纯化水设备电导率高什么原因,怎么解决小型实验纯化水设备,RO反渗透,混合床树脂为什么最近gps搜不到星纯化大肠杆菌的实验方案求原理、实验材料、用具、操作步骤、现象、应用价值, 最近射精太队太多,睾丸疼痛,阴茎勃起无力,感觉精子变少,怎么半?我还未成年啊,可不想讨不到老婆! 基因带六个his标签,蛋白纯化时为何挂不上镍柱求解英语翻译不信查不到,可真正是查不到 his蛋白分离纯化时用咪唑的原因是?是因为his含有咪唑基团么