已知某肽基因全长120bp.拟通过DNA重组技术构建含6×his标签的重组融合蛋白...已知某肽基因全长120bp.拟通过DNA重组技术构建含6×his标签的重组融合蛋白的基因工程大肠杆菌,得到具有细胞增值活
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/11/25 22:36:01
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已知某肽基因全长120bp.拟通过DNA重组技术构建含6×his标签的重组融合蛋白的基因工程大肠杆菌,得到具有细胞增值活性的蛋白产物最终纯度不小于98％,请根据相关原则设计具体的实验方案和技术路线
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根据目的基因序列设计引物；PCR目的基因片段；跑胶,产物回收,纯化；连接T载体（如PMD18t）；转化宿主菌；筛选单克隆；测序；大量培养,提取重组质粒；酶切,电泳,回收,纯化,连接表达载体（如pET系列）,转化；筛选单克隆；酶切鉴定,测序；诱导表达；裂解细胞；过Ni亲和层析；注意：可溶蛋白和包涵体处理根据实验目的是不一样的.若对蛋白纯度不满意可以综合使用其他分离技术,如离子交换树脂等.如his标签影响蛋白活性可切除,此外如果目标蛋白活性较低或失活,可以共表达一些其他蛋白（如分子伴侣等）.若蛋白活性需要糖基化则应该考虑真核表达系统.总之,没有一种表达体系能够完美表达每一种蛋白,根据目的蛋白的结构（是否有稀有密码子、二硫键、糖基化、膜蛋白、复杂折叠、其他翻译后修饰系统）来选择合适的系统,才能达到理想的目的.
可以找上海生工帮做
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已知一段植物dna序列,如何通过分子微生物方法获得该序列所在的基因全长?
基因克隆先克隆出来的小片段怎么比全长基因大呢?先是从水稻里通过cDNA 克隆出来小片段基因是1873bp,最后测得全长基因是1715bp,是什么原因呢?
我想给一个基因的全长测序,可是序列很长,共23166 bp的DNA,请问能否测?需要分段PCR吗?
设计性实验:PCR基因扩增(在线等……)已知PaDREB基因长为600bp左右,请通过PCR扩增获得DNA片段. 要求从引物设计,PCR反应体系和反应程序方面设计该实验.片段如下:ATGGATTATTCGCAGTACGG…………CGTCCTTGTGG
设计性实验:PCR基因扩增(在线等)已知PaDREB基因长为600bp左右,请通过PCR扩增获得DNA片段.要求从引物设计,PCR反应体系和反应程序方面设计该实验.片段如下:ATGGATTATTCGCAGTACGG…………CGTCCTTGTGGAACGATTA
3000bp的DNA如何分段设计引物我的基因全长是2821bp,我开始只是针对全长设计引物,我第一次神奇般的P出来了,可是以后再也没有P出来,我现在打算分段去P.可是我不知道该怎么样分?多少bp为一段,
认识染色体、DNA、基因就好像基因通过生殖细胞传递
基因120bp bp是什么单位呀?怎么换算的?
已知部分基因序列,如何获得全长基因?
如何获得基因的全长(包括基因的DNA结构和cDNA结构)
基因 dna
若已知某蛋白的保守序列,综合采用哪些技术可获得其DNA全长序列?
基因美白和DNA美白是一回事吗?通过改变基因进行美白?
DNA和遗传基因是什么关系?我们常说DNA是非常重要的,常通过DNA鉴定在进行判断.但“DNA和遗传基因”什么关系?
能否算的PCR后的未知DNA 在电泳后算出DNA bp一段未知dna通过随机引物PCR后,再经电泳得出条带,能否算出其未知DNA的Bp,公式是什么?
人工和成法：基因较小 核苷酸已知 可以通过DNA合成仪直接人工合成 如反转录法其过程是（ ）-（人工和成法：基因较小 核苷酸已知 可以通过DNA合成仪直接人工合成 如反转录法其过程是（
已知目的基因全长,如何设计引物克隆全长急用,非常感谢!