胶回收纯化后克隆测序找不到我所用的引物是怎么回事啊我是用10bpRAPD随机引物和模板扩增得到的特异性条带回收纯化,再克隆测序的,可是拿到的测序结果为什么找不到我随机引物序列呢?是

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/29 00:18:20
胶回收纯化后克隆测序找不到我所用的引物是怎么回事啊我是用10bpRAPD随机引物和模板扩增得到的特异性条带回收纯化,再克隆测序的,可是拿到的测序结果为什么找不到我随机引物序列呢?是胶回收纯化后克隆测序

胶回收纯化后克隆测序找不到我所用的引物是怎么回事啊我是用10bpRAPD随机引物和模板扩增得到的特异性条带回收纯化,再克隆测序的,可是拿到的测序结果为什么找不到我随机引物序列呢?是
胶回收纯化后克隆测序找不到我所用的引物是怎么回事啊
我是用10bpRAPD随机引物和模板扩增得到的特异性条带回收纯化,再克隆测序的,可是拿到的测序结果为什么找不到我随机引物序列呢?是不是测序结果有问题

胶回收纯化后克隆测序找不到我所用的引物是怎么回事啊我是用10bpRAPD随机引物和模板扩增得到的特异性条带回收纯化,再克隆测序的,可是拿到的测序结果为什么找不到我随机引物序列呢?是
你是克隆到T载体上的吗?你回收的片段有多大?有可能是测序结果里面不包含你的引物段.要知道,测序结果8,9百bp后面的结果都是不准确的.

切角回收的损失很大,纯化方法换一个吧,,目的条带很短的话他测出来的结果也没有多少可用的,能有几十BP的结果就不错了。最好你换一个引物重新设计,我是采用RAPD方法做的,引物就10bp,是随机引物,不需要我自己再设正向反向引物。问题是我结果拿回来找不到我随机引物序列,我不清楚这是什么状况,是本身测序就有这现象,还是我样品有问题,还是测序公司根本就给我测错了样品...

全部展开

切角回收的损失很大,纯化方法换一个吧,,目的条带很短的话他测出来的结果也没有多少可用的,能有几十BP的结果就不错了。最好你换一个引物重新设计,

收起

胶回收纯化后克隆测序找不到我所用的引物是怎么回事啊我是用10bpRAPD随机引物和模板扩增得到的特异性条带回收纯化,再克隆测序的,可是拿到的测序结果为什么找不到我随机引物序列呢?是 克隆测序结果找不到目的片段的引物序列 TA克隆正反向测序结果都找不到扩增目的条带的引物(载体通用引物也找不到)TA克隆正反向测序结果都找不到扩增目的条带的引物(载体通用引物也找不到,互补序列都试了),请问这是空载 追问引物设计第一次PCR的产物胶回收后用纯化吗,还是可以直接当做底物?目的基因3‘端GC含量太高,导致上下游引物Tm值差别太大,这样可以用吗?是不是内引物条件可以适当放宽?还有,我用的是p PCR产物是单带,切胶回收纯化后,使用ABI3730进行测序,为什么测序没有反应呢?目的片段是120bp.我只是想知道为什么,至于解决方法,呵呵,我已经重新设计引物了。样本太多,一共200多个,建 同样序列,测序之后,发现不同我PCR出一个条带,胶回收后拿去测序,一共测了两次,结果都发现找不到引物,然后用这两次测序结果进行对比,发现根本不是同一个序列.我想请问一下,这是因为我克 我PCR产物大小141bp,纯化后,连接到pGEM-T载体克隆,使用M13通用引物,扩增片段长度是多少?我想知道假如用pGEM-T通用引物M13F 5'TGTAAAACGACGGCCAGT3'和M13 RV 5'CAGGAAACAGCTATGACC3'引物进行菌液PCR,扩增出的片段 请问细菌16SRDNA 测序,测出来的序列里面找不到引物,序列还可靠吗?我做了细菌16SRDNA 测序,但是测序后拼接引物后找不到引物,测出来的序列是对的吗 天根的DNA纯化回收试剂盒怎么样我切胶回收DNA,回收效率都不好 我想克隆一个基因.先进行PCR,PCR产物纯化回收,然后连接,转化,一直不成功.回收的片段很亮.我用的是Ex TAQ,他的加A尾效率应该很高了,做T-A克隆应该没有问题,但就是不成功.我还做了平行试验,con 我最近想设计茎环结构的引物克隆MicroRNA,但不知我发给引物公司的单链引物,在我试验时是自动形成茎环结构,还是要在引物合成后进行相关的处理才会形成茎环.此引物是做miRNA逆转录用的, 请问拿到测序的结果,怎么找不到引物序列? 请问拿到测序的结果,怎么找不到引物序列? 一个未知基因用简并引物克隆出来后,再测序,那么测序分析后后,下一步做什么?基因在植物不同器官的表达,如何设计实验?我的下一步就是做这个 如果只有得到的样品中DNA的量很少(DNA是100bp的),拿去测序会有结果吗?HPLC能探测到量很少的DNA吗?DNA有带荧光标记.经HPLC纯化后直接拿去测序可以吗?要测序的话至少要多少的量呢?引物序列我 你好,是这样的,我回收DNA后,发现电泳时没条带了,是不是没有了啊.我在以回收DNA为模板,用原引物扩也扩不出来浓度是稀释过的哈. 克隆后菌液可以保存几天还能测序?我的pcr产物胶回收后进行的TA克隆.最后用摇出来的菌液重新pcr觉得效果比较好.想拿菌液直接测序.我想知道菌液是四度短期保存么?保存多久之内可以不至于 我的引物合成报告单找不到了,引物是在生工合成的,请问谁知道在哪能查引物合成报告单?