为什么pcr 引物设计出来,下游引物加上酶切位点和保护碱基后,有一个Tm值是负值呀?还有,好多的Tm值都代表什么呢?引物Tm60多,二级结构的Tm达到40度有关系吗?G值有什么用

来源：学生作业帮助网编辑：六六作业网时间：2025/01/01 07:35:44

为什么pcr引物设计出来,下游引物加上酶切位点和保护碱基后,有一个Tm值是负值呀?还有,好多的Tm值都代表什么呢?引物Tm60多,二级结构的Tm达到40度有关系吗?G值有什么用为什么pcr引物设计出来

为什么pcr 引物设计出来,下游引物加上酶切位点和保护碱基后,有一个Tm值是负值呀?还有,好多的Tm值都代表什么呢?引物Tm60多,二级结构的Tm达到40度有关系吗?G值有什么用
为什么pcr 引物设计出来,下游引物加上酶切位点和保护碱基后,有一个Tm值是负值呀?
还有,好多的Tm值都代表什么呢?引物Tm60多,二级结构的Tm达到40度有关系吗?G值有什么用

为什么pcr 引物设计出来,下游引物加上酶切位点和保护碱基后,有一个Tm值是负值呀?还有,好多的Tm值都代表什么呢?引物Tm60多,二级结构的Tm达到40度有关系吗?G值有什么用
Tm值本来就是人为定的一个预测值,三个Tm值代表的是不同的计算方法,常用的是第三种2*AT+4GC.看退火温度时,酶切位点和保护碱基一般是不考虑在内的,因为pcr扩增时这段序列一般是不跟模板结合的,所以计算时也不考虑,只是PCR条件可能需要一些优化.二级结构40度我不懂是什么,一般看二级结构只是主观的看看,太严重的就不要了.G值不知道指的是什么.

基本上设计引物的时候用primer5看看就差不多了，没有非特异没有自身二级结构，然后TM计算就是AT加2GC加4，加在一起就是TM退火温度……不要有连续5个以上一样的碱基，碱基分布均匀一些……就差不多了

为什么pcr 引物设计出来,下游引物加上酶切位点和保护碱基后,有一个Tm值是负值呀?还有,好多的Tm值都代表什么呢?引物Tm60多,二级结构的Tm达到40度有关系吗?G值有什么用 pcr时如何进行上下游的引物设计? pcr引物怎么设计 PCR引物设计怎么样设计pcr引物为什么PCR引物设计中引物可以不从扩增序列两头开始?不从两头开始能得到上下游引物以外的序列吗? pcr引物设计为什么要引入酶切位点 PCR扩增基因设计引物时,用Primer5检测上游引物和下游引物的互补性,显示free energy= 1.50 Kcal/mol这样的引物可用吗? PCR的引物怎样设计, 请问PCR引物怎么设计如何进行pcr引物设计? PCR中引物如何设计, 巢氏PCR引物如何设计? rt pcr的引物设计巢氏PCR引物如何设计? 设计PCR引物时下游引物按互补配对出现 TAG 可以吗? TAG不是终止密码子吗? 为什么PCR要将引物设计在不同的外显子上? 根据RNA序列设计的RT-PCR一对引物中为什么有一个同源引物,一个互补引物呢?