c18制备色谱如何装柱?急c18制备色谱,高压湿法装柱,填料溶剂如何配比?如何装得均匀不沉淀?怎么计算?如何检查装柱结果?
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/11/13 04:20:38
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湿法装柱很简单.
第一,塞棉花.取一小块脱脂棉(或者玻璃纤维)铺平,弄成和层析柱直径一样的圆形,放入层析柱底部,用一根较长的玻璃棒压着棉花,关闭层析柱活塞,加一点洗脱液浸润棉花,赶走棉花中的空气.
第二,拌填料.将填料倒入烧杯中,加入适量洗脱液,用玻璃棒搅拌均匀,多搅一会,确保全部赶走气泡.用量根据层析柱的大小确定.洗脱液可以加多些,可以避免产生气泡.
第三,装填.将上述拌好的填料沿着玻璃棒倒入层析柱.倒完后缓慢抽出玻璃棒.
第四,敲柱子.用橡皮管敲击柱子,赶走层析柱中的气泡,然后打开活塞,流出洗脱液,柱子不可抽干,关闭活塞,就可以加样了.通常如果拌硅胶时加的洗脱液较多,是不会有气泡的
高压湿法就是接个真空泵,操作起来更加高效.
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