您好,TCA使蛋白变性后,会影响我的结果吗?试验中我再测蛋白,浓度就很小了.TCA的作用究竟是为什么?
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/23 07:43:50
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您好,TCA使蛋白变性后,会影响我的结果吗?试验中我再测蛋白,浓度就很小了.TCA的作用究竟是为什么?
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TCA使蛋白变性后蛋白就沉淀下来啦,还测什么浓度 啊
TCA与蛋白质之间主要有以下几个方面的作用:
① 在酸性条件下与蛋白质形成不溶性盐;
② 作为蛋白质变性剂使蛋白质构象发生改变,暴露出较多的疏水性基团, 使之聚集沉淀;
③ 随着蛋白质分子量的增大,其结构复杂性与致密性越大,TCA 可能渗入分子内部而使之较难被完全除去,在电泳前样品加热处理时可能使蛋白质结构发生酸水解而形成碎片,而且随时间的延长这一作用愈加明显;
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TCA与蛋白质之间主要有以下几个方面的作用:
① 在酸性条件下与蛋白质形成不溶性盐;
② 作为蛋白质变性剂使蛋白质构象发生改变,暴露出较多的疏水性基团, 使之聚集沉淀;
③ 随着蛋白质分子量的增大,其结构复杂性与致密性越大,TCA 可能渗入分子内部而使之较难被完全除去,在电泳前样品加热处理时可能使蛋白质结构发生酸水解而形成碎片,而且随时间的延长这一作用愈加明显;
④ 电泳图谱显示,BSA 、HSA 单体谱带有较明显的展宽现象,这可能是由于TCA 的结合,使SDS 与蛋白质的结合量产生偏差,从而造成蛋白质所带电荷的不均一性,造成迁移率的不一致
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您好,TCA使蛋白变性后,会影响我的结果吗?试验中我再测蛋白,浓度就很小了.TCA的作用究竟是为什么?
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