引物18个碱基互补序列,Tm值60左右,加上酶切位点和保护碱基后,Tm值就72了,这么高Tm行吗?能帮我看下,这样设计的引物对吗ATGC TCTAGA GC TCAGATGTCCACGTCCCG前面四个和第11、12个（GC）是保护碱基,中间6

引物18个碱基互补序列,Tm值60左右,加上酶切位点和保护碱基后,Tm值就72了,这么高Tm行吗?能帮我看下,这样设计的引物对吗ATGC TCTAGA GC TCAGATGTCCACGTCCCG前面四个和第11、12个（GC）是保护碱基,中间6 做克隆时,请问在引物前加的一段保护碱基和内切酶序列需要和cDNA互补吗? 一般引物长度为18~30碱基,这里的长度指的是上下游序列（P+和P-）的总长度吗,P+和P-的Tm不同,退火温度怎一般引物长度为18~30碱基,这里的长度指的是上、下游序列（P+和P-）的总长度吗,P+和P-的T 求生物大神解答、与pcr技术有关利用pcr技术扩增目的基因时,引物1和引物2的碱基序列能互补吗? 我的引物设计有30个碱基,tm值分别为88和84,是不是太高了?那退火温度怎么设定啊? 引物的Tm值是什么 miRNA的qPCR的引物Tm值有什么要求吗?60℃左右行吗,还是上游引物需要高点啊? PCR中引物是和谁要互补1.PCR中引物是要和哪条链互补?是我要测目的基因的链,还是其互补链?2.设计的引物可以通过序列库查到其碱基的表达,那么过去设计引物,有很多未知的序列,过去的人怎么 全长cDNA PCR已知cds序列的开头20bp左右作为forward primer,结尾的20bp左右互补序列作为reverse primer,Tm值相差不超过5度.用total RNA 的 T7 RT cDNA作为模版,准备扩增全长cDNA序列,但是总是p不出产物来,是什 试举两个进行PCR引物设计的生物信息学程序,并选用其中的任何一个对GenBank登录号为MMU41636 的序列设计一对PCR引物,要求产物长度为1000-1500bp,引物Tm值范围为40℃-60℃,引物GC%为40%-60%,请写出具体 设计引物要先对模板DNA测序吗?不测序的话又如何知道能设计出碱基互补的引物呢?设计引物是否就是对引物长度的设计?（因为模板是已经存在的,引物只能根据模板序列设计） 引物的TM值如何计算 如何计算引物的Tm值? 如何计算引物的Tm值? TaKaRa PrimeScript II 1st Strand cDNA Synthesis KitOligo dT Primer 的具体序列是什么啊,除了poly（T）还有额外的碱基么?在做3'RACE,不知道如何设计退火温度,5'端上游引物的Tm是60° 引物自身及引物之间不应存在互补序列什么意思 我在做overlap PCR,两个片段一条736bp,一条255bp,20个重叠碱基,四个引物的TM值都是59度,两条都P出来了现在加入两端的引物,就是扩不出来1000的条带,这20重叠有13个是CG对,我不知道是不是退火温度的 为什么pcr 引物设计出来,下游引物加上酶切位点和保护碱基后,有一个Tm值是负值呀?还有,好多的Tm值都代表什么呢?引物Tm60多,二级结构的Tm达到40度有关系吗?G值有什么用