怎样用野生的蘑菇制作菌种,母种怎样制作
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/23 16:17:48
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怎样用野生的蘑菇制作菌种,母种怎样制作
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怎样用野生的蘑菇制作菌种,母种怎样制作
一、配制母种培养基
1、配方:马铃薯(去皮)200g,蔗糖20g,琼脂18-20g,自来水1000ml,pH自然
2、步骤:
(1)将马铃薯洗净,去皮,切成大小约为1㎝3的小块,称200g,放入1000mL水中煮沸20—30分钟,用双层沙布过滤,取其液滤.
(2)定容:加水补足至1000mL.
(3)加入蔗糖至全部溶化.
(4)加琼脂.至全部溶化.
(5)趁热分装试管及三角瓶.
(6)加棉塞:分装完毕后,在试管口或三角瓶口塞上棉花,以阻止外界微生物进入培养基而造成污染,并保证有良好的通气性能.
(7)包扎:棉塞上包一层牛皮纸,扎紧,即可进行灭菌.
(8)灭菌:将上述培养基以0.1Mpa,121℃,高压蒸汽灭菌20min.
(9)搁置斜面:将灭菌的试管培养基管口端搁在玻璃棒或其他合适高度的器具上,搁置的斜面长度以不超过试管总长度的一半为宜.
二、接种(以下均为无菌操作)
1、蘑菇表面消毒:在无菌工作台上,将采集到的野生蘑菇浸入0.1%的升汞水中浸泡1分钟,捞出用无菌水(高压灭菌过的)漂洗3遍.
2、将表面消毒过的蘑菇用无菌刀片切去表皮,切成黄豆大小的菇肉块,用镊子将菇肉块放入斜面试管的培养基上,快速塞好棉塞.
三、培养
将接种好的斜面试管放置在25℃下培养至菌丝爬满斜面.将此斜面菌种再转接几次斜面试管扩大培养后,得到的母种即可用于制作二级菌种即原种了.
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