双酶切酶切体系和buffer怎么设计比较合适?
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/11/17 05:53:47
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双酶切酶切体系和buffer怎么设计比较合适?
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体系不管多大,都有相应的buffer,只要将buffer变为1X工作浓度就行了,两个同时切的话,需要注意酶的量,看单位是多少,一般是1ul的酶切1ug的质粒或者其它DNA序列,尽量酶的体积不能超过体系的10%,因为里面含有甘油,可能会影响酶切效率.
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请教高手10*buffer,2*buffer,双酶切时他们之间怎么换算?例如,20ugDNA(0.5U/ul),用酶A(10U/ul)在1*buffer中的活性是100%,酶B(20U/ul)在1*buffer中活性是100%,问其反应体系该如何?那么酶A和酶B各加多少单位呢
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