跑电泳后,如何根据Marker亮度估计目的条带的浓度?跑电泳后,如何根据Marker亮度来估计目的条带拷贝数?本人Marker一般点5ul.
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/11/15 17:05:32
跑电泳后,如何根据Marker亮度估计目的条带的浓度?跑电泳后,如何根据Marker亮度来估计目的条带拷贝数?本人Marker一般点5ul.
跑电泳后,如何根据Marker亮度估计目的条带的浓度?
跑电泳后,如何根据Marker亮度来估计目的条带拷贝数?本人Marker一般点5ul.
跑电泳后,如何根据Marker亮度估计目的条带的浓度?跑电泳后,如何根据Marker亮度来估计目的条带拷贝数?本人Marker一般点5ul.
博凌科为-为你Marker不能用来估计拷贝数,因为你本身也不知道Marker每一个条带的拷贝数.事实上.你要用单纯比较亮度的方式来估计拷贝数是很难的,除非你用已知拷贝数,已知序列长度的.如果你非要这么做的话,用一个已知拷贝数,和总长度质粒,用单一内切酶,酶切线性化后,和你的样品一起跑,然后可以用软件比如Quantity One计算.
如果非常粗略的估计，还是可以做到的。
一般的MARKER条带浓度是50ng，加亮带是100ng。如果你的条带与其相当，可以估计出你的条带的量，并计算出浓度。
这样有浓度了，有条带大小了，就可以计算拷贝数了。
拷贝数计算公式:
(6.02 x 10的23次拷贝数/摩尔) x (浓度g/ml) / (MW g/mol) = copies/ml.
例：3000 碱...
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如果非常粗略的估计，还是可以做到的。
一般的MARKER条带浓度是50ng，加亮带是100ng。如果你的条带与其相当，可以估计出你的条带的量，并计算出浓度。
这样有浓度了，有条带大小了，就可以计算拷贝数了。
拷贝数计算公式:
(6.02 x 10的23次拷贝数/摩尔) x (浓度g/ml) / (MW g/mol) = copies/ml.
例：3000 碱基质粒， 浓度100 ng/ml ， MW = 3000 bp x 660 dalton/bp = 1.98 x 10的6次 daltons，1 mol = 1.98 x 10的6次 g.
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