大肠杆菌实验的具体步骤

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/23 08:33:22
大肠杆菌实验的具体步骤大肠杆菌实验的具体步骤大肠杆菌实验的具体步骤大肠杆菌测定1、将上述的EC肉汤管继续培养24h,取其产气管的培养物划线接种于伊红美蓝((EMB)板,36士IC培养24士2h.2、检

大肠杆菌实验的具体步骤
大肠杆菌实验的具体步骤

大肠杆菌实验的具体步骤
大肠杆菌测定
1、将上述的EC肉汤管继续培养24h,取其产气管的培养物划线接种于伊红美蓝((EMB)板,36士IC培养24士2h.
2、检查平板上有无具黑色中心有光泽或无光泽的典型菌落.
如有典型菌落,则从每个平板上至少挑取2个典型菌落;如无典型菌落,则从每个平板上至少挑取2个可疑菌落.用接种针接触菌落中心部位.移种到营养琼脂斜面上,36士1℃培养18-24h,
将斜面培养物移种到下列培养基中进行生化试验.
3、一色氨酸肉汤:在36士1℃培养24士2h后,加Kovacs氏试剂.2-0.3mL,上层出现红色为靛基质阳性反应.
4、 MR-VP培养基:在 36士1℃培养48士2h.以无菌操作移取培养物 1mL至 13mX 100mm试管中,加5%.一蔡酚乙醇溶液0.6mL,40%氢氧化钾溶液 0.2mL和少许肌酸结晶,振摇试管后静置 2h,如出现伊红色,为 VP试验阳性.将MR-VP培养物的剩余部分再培养48h滴加5滴甲基红溶液.如培养物变红色,为甲基红试验阳性,若变黄色则为阴性反应.
5、Koser氏拘椽酸盐肉汤:于36士1C培养96h记录有无生长.
6、 LST肉汤:于36士1℃培养48士2h,观察试管中是否产气.
7、革兰氏染色:取 18h营养琼脂斜面培养物作革兰氏染色.大肠杆菌为革兰氏阴性.

2、发酵培养基准备:摇瓶的话好说,灭菌锅就行。发酵罐的话,要先将罐子清洗干净,然后配料,然后灭菌。 3、将培养好的种子液,按一定的接种量接到发酵