有人做过500kd的蛋白western blot的实验吗?可以分享实验条件吗?

有人做过500kd的蛋白western blot的实验吗?可以分享实验条件吗? 我做western,蛋白180KD,请问用多大浓度的分离胶即浓缩胶? ND的quick cast 蛋白胶做western居然不分浓缩胶和分离胶,有人用过么? 蛋白质的分子量在120KD,做western blot 跑胶时,用多大浓度的胶,蛋白每孔上样量是多少?我做的蛋白分子量在120KD,砸出来的结果是很细很浅的, western 想分开65和93kd的蛋白用多大浓度的分离胶 western blot实验 蛋白分子为161KD转膜时的电流及时间该怎么设置? 做western blot,怎样根据分子量的不同配置不同浓度的浓缩胶比如我要做的蛋白是HIF-1α,其分子量为120KD,应该配多少浓度的分离胶? 做western bloting 如何确定蛋白样品的体积 做western之前怎样确定检测蛋白的分子量, 做Western blot ,煮蛋白样,结果变成了黄绿色,怎么回事?做Western blot ,煮蛋白样,结果沉淀中的蛋白样品煮了1min后变成了黄绿色,怎么回事?有没有人遇到过这种情况啊? western 转膜 蛋白总是转不上PVDF膜?有时候还出现花膜跑胶的分子量大小是17kD 恒流转膜,90mA 3H,biorad的电转槽, 请问western blot 跑胶时积层胶和分离胶需要的电压是多大啊,还有转膜的,电压?我跑的蛋白有14kd到130kd的都有 细胞蛋白如何提取?做western blot的 细胞蛋白如何提取 做western蛋白浓度太小怎么办? 请教caspase-3的检测方法问题看到过有关caspase-3的检测方法：(1)免疫细胞化学检测caspase-3蛋白的表达,用悬浮的细胞；(2)western blot 理想结果：caspase-3有32ＫＤ的条带外,还出现了20ＫＤ和10ＫＤ大 已用甲醛固定的组织,能否再提取蛋白做WESTERN,怎样做? 40KD或50KD大小的蛋白用多大浓度的分离胶比较合适 我要做westen,蛋白分子量大约7KD左右,需要多少浓度的分离胶啊?其具体配方是什么?7KD的蛋白需要多少浓度的分离胶?