内参基因是怎么挑选的,我做的是昆虫,不同昆虫用一样的内参吗?

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/19 03:25:44
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内参基因是怎么挑选的,我做的是昆虫,不同昆虫用一样的内参吗?
要在生物体或细胞内稳定表达的基因才能作为PCR的内参基因,因此又名看家基因,由于在不同细胞、组织中常量表达,没有组织特异性,因此不同昆虫之间可以共同使用内参.

内参基因是怎么挑选的,我做的是昆虫,不同昆虫用一样的内参吗? 请解释一下如何用半定量PCR检测基因的表达量,要详细的过程和这么做的原因,情况是这样,我知道首先需要通过调内参基因到相同亮度来确定反应物的量,然后呢,怎么测出这个基因在不同 rp49基因是什么基因,很多做半定量PCR的用这个基因做内参,想了解下该基因是否是rRNA 不同阶段的荧光定量实验都需要做目的基因及内参基因的标准曲线吗 用RT-PCR检测目的基因的表达情况,需将内参基因的条带亮度调成一致.用RT-PCR检测目的基因的表达情况,需将内参基因的条带亮度调成一致,这个很费事,我一般是配50ul的内参基因pcr反应体系,分几 用RT-PCR检测目的基因表达差异,需将内参基因的电泳条带亮度调成一致.用RT-PCR检测目的基因表达差异,需将内参基因的电泳条带亮度调成一致,这个很费事,我一般是在一个管里配50ul的内参基因 我现在要做荧光定量PCR,有3个目的基因,以ACTIN基因作为内参,分析其在根茎、根、茎、叶的表达情况,现在我不清楚应该怎么做,具体步骤是怎么样,我用的是SYBR® Premix Ex TaqTM这个试剂盒,电泳 我准备做定量PCR,需要检测的基因大约有10个左右,请问我需要多少个内参基因?只用1个内参行不行?我们实验室经常用18S和β-actin两个内参,是不是内参越多越好?怎样去选择最合适的内参基因呢 还想再向您请教下 关于荧光定量PCR 相对定量内参基因的选择,如果我想用18SrRNA,我该怎么得到这个内参呢 我是通过循环次数的改变把不同实验组的内参基因调成一样的条带,然后在做目的基因时按 求助水稻的actin 内参基因引物想用水稻的内参做荧光定量PCR,有哪位大侠有水稻内参Actin的引物么?在下感激不尽! 如何选一个好的内参基因看了篇关于内参基因筛选的文章,文章中只是说了不同的组织,不同的环境呢?没提,受胁迫以后这些候选内参基因会怎么样啊? 我是新手,在相对定量PCR中,采用2 -△△Ct 我在文库中看到,有两个假设的前提,一是目的基因与内参基因扩增效率相同;二是目的基因与内参基因扩增效率相同等于1;两个假设成立才能用这种 real-time PCR中内参基因的CT值做了几次real-time PCR ,选的18s做内参基因,是直接购买的,所以没有问题,但是测得的CT值在对照组中和实验组中均有误差,相差约0.3左右,想请问这样的误差正常吗?如果 请问,GAPDH作为RT-PCR内参的原理是什么呀?我知道为什用它做内参了,就是不清楚怎么用它, 做RT-PCR内参的作用是什么?应该如何选择管家基因啊? 做RT-PCR内参的作用是什么?应该如何选择管家基因 荧光定量pcr扩得出目的基因但是检测不到内参gapdh我做的是肿瘤细胞,目的基因smo.还有就是经常有3个重复孔内有一个扩不出东西,是由于引物或模板加少了么