我想在PCR产物上加一个酶切位点,请问正向引物和反向引物酶切位点系列一样吗?

我想在PCR产物上加一个酶切位点,请问正向引物和反向引物酶切位点系列一样吗? PCR时产物末端加A,A加在3’端还是5’端? 我想用PCR产物自己连着成一个质粒 该如何操作 请问原位RT-PCR产物如何定量? 您好,请问末端加了酶切位点的PCR产物纯化回收后,做自连之前需要进行什么修饰吗,盼回答, 请问PCR产物室温下放置一个星期会全部降解吗? 刚刚学做克隆,看到网上有两种平末端DNA加A尾方法,一种是切胶回收后加,另一种是直接加在PCR产物中,想请问：1.第二种加A方法,加Taq酶和dNTPs了,还要不要加buffer~2.是在PCR 72度延伸时暂停加效果 PCR条件优化请问高手PCR产物目的条带以下有杂带,PCR条件该如何优化? 请问PCR产物双酶切后跑电泳结果是怎样的,对PCR产物做这个有意义吗 在做荧光定量PCR时,PCR仪检测不到荧光信号,但是产物用琼脂糖电泳后有清晰的目的条带,请问这是为什么? 我想克隆一个基因.先进行PCR,PCR产物纯化回收,然后连接,转化,一直不成功.回收的片段很亮.我用的是Ex TAQ,他的加A尾效率应该很高了,做T-A克隆应该没有问题,但就是不成功.我还做了平行试验,con 从NCBI上查找到的一个目的基因做PCR,设计引物时PCR产物长度是这个基因的全部序列吗?CAGTCTAATGATTACCGTCCTTCATACCACTTCACACCGGACCAGTACTGGATGAACGAGCCAAACGGCCTGATTAAAATCGGATCCACCTGGCACCTGTTCTTTCAACACAATCCGACGGCCAATGTATGGGGCAACA 关于平末端DNA加A的一些问题~刚刚学做克隆,看到网上有两种平末端DNA加A尾方法,一种是切胶回收后加,另一种是直接加在PCR产物中,想请问：1.第二种加A方法,加Taq酶和dNTPs了,还要不要加buffer~2. 在测序前如何进行pcr产物的酶切纯化,注意我想知道的是用于测序的pcr产物酶切纯化,不是用于克隆的酶切. 有的聚合酶在PCR产物的3,末端可以接上碱基A,易于与T载体连接,请问载体上的T碱基位于哪个末端?如果也位于3,端,似乎他们两个连不上啊 5端race实验PCR产物拖带5端race实验PCR产物琼脂糖检测,电泳道有很明显的拖带,在曝光时间长的情况下隐隐约约能看到目的带,请问是什么原因啊? 我想请问 一个外星人 在地球上怎么活? 请问,把PCR产物拿去生物公司测序的问题是不是也是先要将PCR产物DNA连到载体上,再用载体的通用引物测序?应该不是吧……这个应该属于克隆测序吧?PCR产物直接测序是否就是直接用你给他的引