rt pcr 要求个分组的RNA模板量一样吗?本人正在做RTPCR,目的是比较给药组,空白组,阳性对照组各组间的目基因的表达情况,分析该药对目的基因表达的影响.我的问题是,实验的时候是否要求各组的

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/26 20:50:29
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rt pcr 要求个分组的RNA模板量一样吗?本人正在做RTPCR,目的是比较给药组,空白组,阳性对照组各组间的目基因的表达情况,分析该药对目的基因表达的影响.我的问题是,实验的时候是否要求各组的
rt pcr 要求个分组的RNA模板量一样吗?
本人正在做RTPCR,目的是比较给药组,空白组,阳性对照组各组间的目基因的表达情况,分析该药对目的基因表达的影响.我的问题是,实验的时候是否要求各组的PT-PCR的模板量一样多呢?

rt pcr 要求个分组的RNA模板量一样吗?本人正在做RTPCR,目的是比较给药组,空白组,阳性对照组各组间的目基因的表达情况,分析该药对目的基因表达的影响.我的问题是,实验的时候是否要求各组的
希望有用.

当然啦,控制变量嘛!

模板的多少首先就会影响到整个反应,有时过多的话甚至不能扩增
理论上一个分子的RNA也能扩增到目的条带的
模板的定量比较麻烦
一般情况下,只要不影响到整个PCR体系,模板的多少对最后结果影响很小.
我试过同一组反应体系加1微升和0.4微升P到的目的条带亮度相当
当然,上述只为本人经验啊...呵呵,不知道对你有没有用...

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模板的多少首先就会影响到整个反应,有时过多的话甚至不能扩增
理论上一个分子的RNA也能扩增到目的条带的
模板的定量比较麻烦
一般情况下,只要不影响到整个PCR体系,模板的多少对最后结果影响很小.
我试过同一组反应体系加1微升和0.4微升P到的目的条带亮度相当
当然,上述只为本人经验啊...呵呵,不知道对你有没有用

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你说的RT指的是realtime吧?
反转试剂盒对于处理初始RNA样品的量有说明,你只要把用来做反转录的其实RNA量控制在那个范围以内就好了。
至于上荧光定量PCR仪就没有关系了,你有内参作为校准,得到的都是相对值,你是用相对值来进行比较。

rt pcr 要求个分组的RNA模板量一样吗?本人正在做RTPCR,目的是比较给药组,空白组,阳性对照组各组间的目基因的表达情况,分析该药对目的基因表达的影响.我的问题是,实验的时候是否要求各组的 使用Access RT-PCR系统需要RNA的量是多少? 知道RNA浓度,反转录时怎么计算加的模板量呢 ,RNA浓度单位是ng/ul 模板的加入量单位为ug,还有PCR也是ug我的RNA浓度是1749.91ng/ul 反转录试剂盒要求加1ugRNA怎么算呢 ,有人说加1ul就好了,会不会太少 RT-PCR的RNA如何定量 我做RT-PCR要用Marker和β-actin吗?我现在要做RT-PCR,从大鼠肝细胞中提RNA,听一个学长说提出总RNA后可以取一半跑下电泳,看看RNA的量,这一步需不需要Marker呢?还有之后做PCR跑电泳是不是还要订个β-ac RT-PCR与模板的浓度有关系吗 请问RT-PCR:RNA跑胶没有明显条带,能否做成目标片段RNA的PCR? DNA,RNA,cDNA在实验中作为模板的要求是什么?不仅是PCR,其他生物实验它们三个作为模板的要求还有什么?我是初学者~还有比如酶切之类~ DNA RNA做PCR问题请问DNA做PCR的要求怎么样,比如DNA多长能做多长不能做,越长越好还是越短越好’反之RNA做RT-PCR也一样吗?另外DNA直接做PCR,而RNA则分反转录PCR和荧光定量PCR对吗?荧光定量是只用来 RT-PCR提取的是总RNA还是mRNA 胁迫处理过的RNA反转的cDNA用作模板做PCR,产物能否做转基因 定量RT-PCR在哪一步定量是定RNA 的量还是定cDNA的量?16sRNA的对照如何做? 急,初级菜鸟问个问题:真菌 目的基因的获取,是抽取RNA用RT-PCR,还是直接抽取DNA PCR呢? 求RT-PCR前RNA定量重要吗,最好用什么法定量? DNA中混有RNA会影响PCR结果吗我的模板里混有RNA,会对PCR产生什么样的影响.我把提取的DNA跑了个电泳,总DNA带和RNA带在两头,中间还有两条淡淡的带是什么呢?新手上路,先谢过啦. PCR扩增时RNA引物序列设计时,引物序列是与目标基因前的序列互补呢,还是与目标基因互补?我也遇到了这样的问题,做负链RNA病毒RT-PCR的时候,我不知道以哪个为模板设计引物,是用原始序列设计 RT-PCR 中 反转之后 PCR部分 DNA 的用量我用2ug RNA 25ul体系做完反转后 pcr部分用TAKARA的TAq酶 参考是50ul体系:给的模板用量参考是:人基因组DNA 0.1-1ug ,大肠杆菌的10-100ng ,入DNA 0.5-5ng,质粒DNA 0.1-10ng 为什么pcr的重复性会这么不好呢,难道是PCR仪有问题我最近做RT-PCR,可重复性不好,已经重提了两次的RNA,内参没问题,就是特异性基因有问题?求大家帮忙分析下原因.老师说可能师弟用我的模板后