rt pcr 要求个分组的RNA模板量一样吗?本人正在做RTPCR,目的是比较给药组,空白组,阳性对照组各组间的目基因的表达情况,分析该药对目的基因表达的影响.我的问题是,实验的时候是否要求各组的
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/26 20:50:29
rt pcr 要求个分组的RNA模板量一样吗?本人正在做RTPCR,目的是比较给药组,空白组,阳性对照组各组间的目基因的表达情况,分析该药对目的基因表达的影响.我的问题是,实验的时候是否要求各组的
rt pcr 要求个分组的RNA模板量一样吗?
本人正在做RTPCR,目的是比较给药组,空白组,阳性对照组各组间的目基因的表达情况,分析该药对目的基因表达的影响.我的问题是,实验的时候是否要求各组的PT-PCR的模板量一样多呢?
rt pcr 要求个分组的RNA模板量一样吗?本人正在做RTPCR,目的是比较给药组,空白组,阳性对照组各组间的目基因的表达情况,分析该药对目的基因表达的影响.我的问题是,实验的时候是否要求各组的
希望有用.
当然啦,控制变量嘛!
模板的多少首先就会影响到整个反应,有时过多的话甚至不能扩增
理论上一个分子的RNA也能扩增到目的条带的
模板的定量比较麻烦
一般情况下,只要不影响到整个PCR体系,模板的多少对最后结果影响很小.
我试过同一组反应体系加1微升和0.4微升P到的目的条带亮度相当
当然,上述只为本人经验啊...呵呵,不知道对你有没有用...
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模板的多少首先就会影响到整个反应,有时过多的话甚至不能扩增
理论上一个分子的RNA也能扩增到目的条带的
模板的定量比较麻烦
一般情况下,只要不影响到整个PCR体系,模板的多少对最后结果影响很小.
我试过同一组反应体系加1微升和0.4微升P到的目的条带亮度相当
当然,上述只为本人经验啊...呵呵,不知道对你有没有用
收起
要
你说的RT指的是realtime吧?
反转试剂盒对于处理初始RNA样品的量有说明,你只要把用来做反转录的其实RNA量控制在那个范围以内就好了。
至于上荧光定量PCR仪就没有关系了,你有内参作为校准,得到的都是相对值,你是用相对值来进行比较。