【Help】所p片段内含有与引物高度相似的片段该如何设计引物PCR我要P一个基因,Forward要带入一段酶切位点(XbaI),但是基因的头二十多bp的碱基和序列内500多和800多的地方分别有两个高度相似

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/23 06:32:54
【Help】所p片段内含有与引物高度相似的片段该如何设计引物PCR我要P一个基因,Forward要带入一段酶切位点(XbaI),但是基因的头二十多bp的碱基和序列内500多和800多的地方分别有两个高

【Help】所p片段内含有与引物高度相似的片段该如何设计引物PCR我要P一个基因,Forward要带入一段酶切位点(XbaI),但是基因的头二十多bp的碱基和序列内500多和800多的地方分别有两个高度相似
【Help】所p片段内含有与引物高度相似的片段该如何设计引物PCR
我要P一个基因,Forward要带入一段酶切位点(XbaI),但是基因的头二十多bp的碱基和序列内500多和800多的地方分别有两个高度相似的区域,这种PCR该如何做……急求,

【Help】所p片段内含有与引物高度相似的片段该如何设计引物PCR我要P一个基因,Forward要带入一段酶切位点(XbaI),但是基因的头二十多bp的碱基和序列内500多和800多的地方分别有两个高度相似
又不一定非要从那个基因的头开始P,只要把那个基因整个包含进去就行了,如果你非要刚好从头开始那就只能分段P然后再连啦,其实高度相似不是完全相同吧 还是可以的 毕竟大小差别貌似挺大的 跑胶还是可以分开的

引物的设计可以有很多种选择,例如你要特异性高可以设计长一点,引物上每多一个碱基可以增加几倍的特异性(多少倍忘了,看书),不过也有可能导致引物分数过低。也可以设计低特异性的,差几百个bp胶上完全看得出来,一切就完事了。
不过你带酶切位点,那下一步肯定是酶切克隆,那直接跑完切胶回收就完了~。。怎么设计不可以?...

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引物的设计可以有很多种选择,例如你要特异性高可以设计长一点,引物上每多一个碱基可以增加几倍的特异性(多少倍忘了,看书),不过也有可能导致引物分数过低。也可以设计低特异性的,差几百个bp胶上完全看得出来,一切就完事了。
不过你带酶切位点,那下一步肯定是酶切克隆,那直接跑完切胶回收就完了~。。怎么设计不可以?

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【Help】所p片段内含有与引物高度相似的片段该如何设计引物PCR我要P一个基因,Forward要带入一段酶切位点(XbaI),但是基因的头二十多bp的碱基和序列内500多和800多的地方分别有两个高度相似 设计的一对引物的两端带上Xhol1和 Not1酶切位点,但是所P片段的内部有与酶切位点相似的序列是否酶切会失败相似度只差一个碱基,是不是酶切得不到所P 的 目的基因? 利用PCR技术扩增目的基本因,其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)图中引物中为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础.从理论上推测,第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占比例为 利用PCR技扩增目的基因,从理论上推测,第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为请给出详细的解释,比如图解 转化后挑取含有目的片段的单菌落摇菌扩增以后划盘子,几天后挑取部分菌落做PCR无带,不知是何原因?划盘子后剩余的菌液提质粒测序结果与预期的片段相同,通用引物和自身引物开始都能得 上下游引物 我有一个单链dna目的片段 与这个目的片段结合的是哪种引物?与互补链结合的是? 利用PCR技术扩增目的的基因,复制按指数增长这个我知道,但我有个问题,第一次复制时有两个引物A和B,第四轮复制时含有引物A的DNA片段所占比例为15/16这是为什么?第四次复制有16个DNA分子,为什 谁能通俗易懂的给我解释一下PCR反应过程中,引物与模板如何结合?扩增出来的是上下游引物之间的片段呢?还是就是引物片段?最终目的不是扩增目的基因,观察多态性的. 荧光定量PCR 溶解曲线与什么有关与产物片段大小有关还是与引物的溶解温度有关 进行PCR扩增为什么扩不出目的片段?就连非特异性条带也没有,引物与模板分得清清楚楚 pcr 为什么要同时用上下游引物可以只用上游,或者下游引物吗?是不是同时用上下游,这样才能P出想要的大小片段.如果只用上游或者下游,会P的过大或者过小 pcr条件设定:我要p一个2000+bp的片段 pcr条件怎样设我的两个引物都是33bp GC含量为43% p过两次 都是引物二聚体 引物的命名与目的DNA片段长度有关系吗或者怎么样才能一看引物的名字就能大概知道目的片段的长度呢?灰常感谢~~ 根据已知基因mRNA保守序列设计多对引物,然后在基因组上p相应片段,却老是p不出来,或者p出来较亮的片段测 母乳内含有婴儿所需要的营养物质,还含有 塞翁失马焉知非福与老子所说的什么相似? P为△ABC内一点,连接PA,PB,PC,在△PAB,△PBC和△PAC中,如果存在一个三角形与△ABC相似,那么就称P为△ABC的自相似点,已知在ABC中角ACB=90 AC=3 BC=4,P是内相似点则cos角PAB等于 通过设计带酶切位点的PCR引物来使目的片段添加限制性酶切位点的原理是什么?百思不得其解,我的意思是说引物人为添加上的酶切位点与要扩增的片段也不匹配,怎么能随着引物克隆到目的片