【Help】所p片段内含有与引物高度相似的片段该如何设计引物PCR我要P一个基因,Forward要带入一段酶切位点(XbaI),但是基因的头二十多bp的碱基和序列内500多和800多的地方分别有两个高度相似
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/23 06:32:54
【Help】所p片段内含有与引物高度相似的片段该如何设计引物PCR我要P一个基因,Forward要带入一段酶切位点(XbaI),但是基因的头二十多bp的碱基和序列内500多和800多的地方分别有两个高度相似
【Help】所p片段内含有与引物高度相似的片段该如何设计引物PCR
我要P一个基因,Forward要带入一段酶切位点(XbaI),但是基因的头二十多bp的碱基和序列内500多和800多的地方分别有两个高度相似的区域,这种PCR该如何做……急求,
【Help】所p片段内含有与引物高度相似的片段该如何设计引物PCR我要P一个基因,Forward要带入一段酶切位点(XbaI),但是基因的头二十多bp的碱基和序列内500多和800多的地方分别有两个高度相似
又不一定非要从那个基因的头开始P,只要把那个基因整个包含进去就行了,如果你非要刚好从头开始那就只能分段P然后再连啦,其实高度相似不是完全相同吧 还是可以的 毕竟大小差别貌似挺大的 跑胶还是可以分开的
引物的设计可以有很多种选择,例如你要特异性高可以设计长一点,引物上每多一个碱基可以增加几倍的特异性(多少倍忘了,看书),不过也有可能导致引物分数过低。也可以设计低特异性的,差几百个bp胶上完全看得出来,一切就完事了。
不过你带酶切位点,那下一步肯定是酶切克隆,那直接跑完切胶回收就完了~。。怎么设计不可以?...
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引物的设计可以有很多种选择,例如你要特异性高可以设计长一点,引物上每多一个碱基可以增加几倍的特异性(多少倍忘了,看书),不过也有可能导致引物分数过低。也可以设计低特异性的,差几百个bp胶上完全看得出来,一切就完事了。
不过你带酶切位点,那下一步肯定是酶切克隆,那直接跑完切胶回收就完了~。。怎么设计不可以?
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