荧光定量—标准曲线的相关问题我是用的SYBR green染料法做的绝对定量,标准品是按照十倍稀释的.从原浓度到10的负10倍浓度,但是测出来的值,所有的浓度值都是相近的,我是跑的目的基因做的质
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2025/01/24 02:16:22
荧光定量—标准曲线的相关问题我是用的SYBR green染料法做的绝对定量,标准品是按照十倍稀释的.从原浓度到10的负10倍浓度,但是测出来的值,所有的浓度值都是相近的,我是跑的目的基因做的质
荧光定量—标准曲线的相关问题
我是用的SYBR green染料法做的绝对定量,标准品是按照十倍稀释的.从原浓度到10的负10倍浓度,但是测出来的值,所有的浓度值都是相近的,
我是跑的目的基因做的质粒,同一个基因在不同浓度下得到的CT值基本就是不变的。愁死我了。
荧光定量—标准曲线的相关问题我是用的SYBR green染料法做的绝对定量,标准品是按照十倍稀释的.从原浓度到10的负10倍浓度,但是测出来的值,所有的浓度值都是相近的,我是跑的目的基因做的质
首先,看看空白对照是不是也有Ct值,这种情况可能是样品污染,或者是你用的各种试剂有污染.如果你们实验室做这个基因做的很多的话,污染的可能性是很大的.最好换个地方做,而且是要在超净工作台上.避免所有的可污染的状况.
如果不是污染的话,那么样品的浓度也许可能还是高,造成最后负10倍稀释的样品DNA的浓度还是较高,所以看不出Ct值的变化.选择合适的稀释梯度也是比较重要的.
你是怎么稀释的,是取上一级的1加9的水么,10+90这样取得 我看有些文献是一直从原浓度取 然后加9、99、999这样 可是我需要的浓度范围比较大 不合适啊我是这么加的:以10的1-7稀释,体积100ul为例; 1. 取7个管子,分别加水90ul, 2. 取原浓度10ul加到第一管中,混匀,标号10-1(上标,是不是这个倍数,有点晕) 3. 取10-1中10ul加到第二管中,混匀,标号10-...
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你是怎么稀释的,是取上一级的1加9的水么,
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