为什么我做Western,电泳时预染Marker很值条带也很清晰,但是转膜后膜上条带都没有了marker是彩色转移缓冲液配比:甘氨酸(MW75.07) 2.9g,Tris(MW121.14) 5.8g,SDS 0.37g,甲醇 200ml,蒸馏水至 1000ml.转移
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/11/17 01:30:14
为什么我做Western,电泳时预染Marker很值条带也很清晰,但是转膜后膜上条带都没有了marker是彩色转移缓冲液配比:甘氨酸(MW75.07)2.9g,Tris(MW121.14)5.8g,S
为什么我做Western,电泳时预染Marker很值条带也很清晰,但是转膜后膜上条带都没有了marker是彩色转移缓冲液配比:甘氨酸(MW75.07) 2.9g,Tris(MW121.14) 5.8g,SDS 0.37g,甲醇 200ml,蒸馏水至 1000ml.转移
为什么我做Western,电泳时预染Marker很值条带也很清晰,但是转膜后膜上条带都没有了
marker是彩色
转移缓冲液配比:
甘氨酸(MW75.07) 2.9g,Tris(MW121.14) 5.8g,SDS 0.37g,甲醇 200ml,蒸馏水至 1000ml.
转移缓冲液在冰箱冷冻,没有结冰.
膜用甲醇处理15秒,水洗一次.
转膜温度,十度左右,80v两小时
转膜之后,胶上没有颜色.
为什么我做Western,电泳时预染Marker很值条带也很清晰,但是转膜后膜上条带都没有了marker是彩色转移缓冲液配比:甘氨酸(MW75.07) 2.9g,Tris(MW121.14) 5.8g,SDS 0.37g,甲醇 200ml,蒸馏水至 1000ml.转移
不排除是预染Marker质量又问题
可能是转反了,或者是转过了。而且转膜不是恒流么,你怎么是恒压转。我一般是300mA,90分钟。转膜没有反,转膜也有恒压转的。我的电流没有超过300,应该不会转过了那你膜上的那个marker是最大的那个还是最小的那个?看样子是没转过去,所以颜色都漏到外面了。不是最大的,也不是最小的,是中间的...
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可能是转反了,或者是转过了。而且转膜不是恒流么,你怎么是恒压转。我一般是300mA,90分钟。
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方向反了?
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为什么我做Western,电泳时预染Marker很值条带也很清晰,但是转膜后膜上的预染Marker就变的很歪,非常歪.并且条带特别的不清晰,根本看不出条带!求教~
为什么我做Western,电泳时预染Marker很值条带也很清晰,但是转膜后膜上条带都没有了marker是彩色转移缓冲液配比:甘氨酸(MW75.07) 2.9g,Tris(MW121.14) 5.8g,SDS 0.37g,甲醇 200ml,蒸馏水至 1000ml.转移
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