血浆中蛋白质含量测定用什么方法?另外,收集的血浆标本怎样保存?

来源：学生作业帮助网编辑：六六作业网时间：2024/12/22 13:53:48

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下面是蛋白质测定的方法：定氮法,双缩尿法（Biuret法）、Folin－酚试剂法（Lowry法）和紫外吸收法.考马斯亮蓝法（Bradford法）.
凯氏定氮灵敏度低,适用于0.1.0mg氮,误差为 ±2％费时
10小时将蛋白氮转化为氨,用酸吸收后滴定非蛋白氮（可用三氯乙酸沉淀蛋白质而分离）用于标准蛋白质含量的准确测定；干扰少；费时太长
双缩脲法（Biuret法）灵敏度低 20mg 中速 20~30分钟多肽键＋碱性Cu2＋®紫色络合物硫酸铵；Tris缓冲液；某些氨基酸用于快速测定,但不太灵敏；不同蛋白质显色相似
紫外吸收法较为灵敏 50～100mg 快速 10分钟蛋白质中的酪氨酸和色氨酸残基在280nm处的光吸收各种嘌吟和嘧啶；
Folin－酚试剂法（Lowry法）灵敏度高 5mg 慢速 40～60分钟双缩脲反应；磷钼酸－磷钨酸试剂被Tyr和Phe还原硫酸铵；Tris缓冲液；甘氨酸；
各种硫醇耗费时间长；操作要严格计时；颜色深浅随不同蛋白质变化
考马斯亮蓝法(Bradford法) 灵敏度最高 5mg 快速5～15分钟考马斯亮蓝染料与蛋白质结合时,其lmax由465nm变为595nm 强碱性缓冲液；
SDS 最好的方法；干扰物质少；颜色稳定；颜色深浅随不同蛋白质变化
至于收集的血浆标本怎样保存,个人认为是冷冻.或者冷藏.
这是我找来的,供你参考.
采集血液的时候加入抗凝剂,防止血液凝固,然后4度5000rpm离心收集细胞,然后保存于-80度超低温冰箱里.
再拿出来提取DNA用于做PCR就好.
提取血液的DNA是针对血液里的白细胞,红细胞是没有细胞核的,将白细胞直接分离出来提DNA效果会更好一点.其实凝固的全血也是能够提出DNA的,但是产率和质量可能会低.
提取DNA的时候最好是保持样品新鲜,-20度不是长期保存组织的方法,最好还是-80度保存样品.

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