用相同的引物做PCR和qPCR的退火温度是一样的吗?我看文献里的,好像不一样,为什么?

用相同的引物做PCR和qPCR的退火温度是一样的吗?我看文献里的,好像不一样,为什么? 关于退火温度与引物Tm~我用PP5做的引物发现引物Tm值比退火温度低 这很奇怪啊,做PCR是不是退火温度一定要比Tm高呢? 退火温度低会对PCR产生什么影响?我做菌落PCR,使用一个特异性上游引物和一个T7下游通用引物,退火温度用的是较低的48度,但引物的Tm分别为57,71,阳性对照都没有出结果,请问是怎么回事呢?退火 为什么做PCR设定引物退火温度时设定的退火温度要比合成引物得到的引物Tm值低几度? ISSR-PCR引物的退火温度问题我做ISSR-PCR引物的退火温度能不能直接使用primer5.0这个软件计算得出的退火温度.理论上来说这是最佳的退火温度吗? pcr引物退火温度55度时不行,58度可以,为什么在做PCR时,引物用55度的退火温度扩不出来,而用58度却扩出来了,为什么 PCR过程中引物的碱基数量与种类 和 退火温度有什么关系?理由 PCR引物的发卡结构和二聚体可以通过提高退火温度克服吗 PCR引物的发卡结构和二聚体可以通过提高退火温度克服吗 关于细菌基因组PCR的问题向做过细菌PCR的请教：体系一般都是多少,退火温度呢我们做过退火温度有48度、43度、56度,引物是通用引物1492R和27F,模板和引物都没问题,是不是引物和模板不匹配,10 ssr引物筛选我是做分子标记的,现在遇到一些问题?1、根据引物报告单上的退火温度,上游和下游温度不一样怎么选择?2、我有600对引物,3个亲本,现在要筛一遍,用96孔的PCR板P的时候,每一对退火 关于引物的退火温度?为什么用公式计算的引物退火温度和试剂公司送来的合成报告单上的退火温度不一致? 用primer 5.0 设计引物的时候,哪个才是真正的PCR产物退火温度Tm,看哪个? 求助巢式PCR退火温度的设定我最近准备做巢式PCR,下游引物用oligo dT,上游用两个基因特异性引物,但上游的两个引物和下游的oligo dT相比,Tm值差了将近10度,这样退火温度怎么设定呢? 在做RT-PCR时,或者是一般的PCR时,退火温度怎么设置,退火温度和Tm值之间有怎么样的关系? 请问小鼠的DMC1基因是普通的基因吗?不是特殊基因吧.用该基因设计引物,以CDNA为模板,PCR后只有引物二聚没有目的条带,退火温度做了梯度,还是没有条带.是什么原因呢,我的同事用相同的模板, 做pcr,如何确定最佳退火及延伸的时间和温度? 设计引物的时候上下游引物的退火温度分别是56.9和56摄氏度,PCR时退火温度应选多少度!文献上62摄氏度,我感觉有点不对劲啊!给出PCR退火温度的计算的方法！谢谢··