设计引物的时候上下游引物的退火温度分别是56.9和56摄氏度,PCR时退火温度应选多少度!文献上62摄氏度,我感觉有点不对劲啊!给出PCR退火温度的计算的方法！谢谢··

设计引物的时候上下游引物的退火温度分别是56.9和56摄氏度,PCR时退火温度应选多少度!文献上62摄氏度,我感觉有点不对劲啊!给出PCR退火温度的计算的方法！谢谢·· ssr引物筛选我是做分子标记的,现在遇到一些问题?1、根据引物报告单上的退火温度,上游和下游温度不一样怎么选择?2、我有600对引物,3个亲本,现在要筛一遍,用96孔的PCR板P的时候,每一对退火 用primer 5.0 设计引物的时候,哪个才是真正的PCR产物退火温度Tm,看哪个? pcr时如何进行上下游的引物设计? 关于引物的退火温度?为什么用公式计算的引物退火温度和试剂公司送来的合成报告单上的退火温度不一致? 我设计了引物,结果生物公司合成的引物退火温度比我设计的低10度,为什么,我用哪个退火温度 请教如何计算出兼并引物的退火温度我是一个新手,如何根据公司送来的兼并引物的单子上的Tm值推出实际PCR时的退火温度呢?引物单子上有两个Tm值,分别是1M 钠离子,50mM钠离子条件下的Tm值.实 为什么设计出来的引物退火温度过高?我使用的是oligo软件 一些通用引物的退火温度?比如m13 如何进行引物退火温度的梯度设置 为什么PCR引物设计中引物可以不从扩增序列两头开始?不从两头开始能得到上下游引物以外的序列吗? 为什么生物公司合成的引物退火温度比设计的温度要低10度,我用哪个! 为什么做PCR设定引物退火温度时设定的退火温度要比合成引物得到的引物Tm值低几度? 引物退火温度是53度,如何设置两个梯度的退火温度 退火的温度选择决定于引物的碱基序列?A 引物序列越长 退火温度越低B 引物序列越短 退火温度越低C 引物中C G 含量越高 退火温度越高D 引物中A T 含量越低 退火温度越低选择是A退火就是复性 我在扩一基因的全长,设计的一对特异引物退火温度一个47度,一个64度,我该怎么确定退火温度? pp5引物设计用PRIMER自动搜索设计的多对引物中,能不能用一对引物的上游与另一对引物的下游配对 退火温度低会对PCR产生什么影响?我做菌落PCR,使用一个特异性上游引物和一个T7下游通用引物,退火温度用的是较低的48度,但引物的Tm分别为57,71,阳性对照都没有出结果,请问是怎么回事呢?退火