实时定量PCR的曲线图怎么看?包括标准扩增曲线,目的基因熔解曲线,目的基因的扩增曲线,都怎么看?三个曲线各有什么意义?

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/11/21 21:40:08
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实时定量PCR的曲线图怎么看?
包括标准扩增曲线,目的基因熔解曲线,目的基因的扩增曲线,都怎么看?
三个曲线各有什么意义?

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先看目的基因熔解曲线,如果只有一个尖锐的锋,而且不是很低温度下出来的(那时Dimer),说明这对引物可以用,这时看Ct值才有意义.
标准扩增曲线看Ct值得间隔是否均匀,一般10倍稀释间隔3.3个ct值,同时要保证你的目的基因的Ct值落在你的标准曲线内,这个标曲才是合格的.根据标曲可以推算出扩增效率.
目的基因的扩增曲线要看起起飞时间,保证Ct值在20几比较好,30个以后就不好说了,最好要有水样作对照,水样起飞前(有时)的扩增才是有意义的.