pFASTbac 用 BamH1单酶切 切完后 出现两条带 怎么回事图

pFASTbac 用 BamH1单酶切 切完后 出现两条带 怎么回事图 用fermentas的Kpn1和bamH1做双酶切,用的buffer是Buffer bamH1,做了几次都是质粒自连,怎么办 请问这位高手,我也是用pfastbac载体做家蚕细胞的 请问怎么构建质粒表达载体 请问有人用过pFastBac-HTA载体吗?这个载体本身只有4800bp左右,能装下10000bp的片段吗?急!谢谢各位了!在线等! 酶切时,这个酶“BamH1”怎么读呀 假设一基因表达载体上仅有EcoR1限制酶和BamH1限制酶的切割位点（个数未知）当仅用EcoR1限制酶切割时,产物仅一种长为14kb(1kb=1000碱基对）的DNA双链当仅用BamH1限制酶切割时,产物有2.5kb与11.5kb两 我想问问我加的酶切位点和保护碱基对不对AIF-ECOR1：cg gaattc gctacaagcacgctctaacatct AIF-BAMH1: c ggatcc cggactctgtctcactctctgat 保护碱基和酶切位点我用空格分开了,好辨认!扩出来后准备双酶切后连接质 BamH1和hind3双酶切一般要切多长时间啊? 载体双酶切后消失,怎样解决我用的是bamh1,xho1两个酶（Fermentas公司的,用的是bufferR）,双酶切pFastBac1这个载体,50微升反应体系,只切3个小时,各用1微升的酶,跑胶一点都看不到有大片段,可以看到 载体双酶切后消失,怎样解决我用的是bamh1,xho1两个酶（Fermentas公司的,用的是bufferR）,双酶切pFastBac1这个载体,50微升反应体系,只切3个小时,各用1微升的酶,跑胶一点都看不到有大片段,可以看到 pET28A质粒双酶切后回收不到?用takara 的BamH1和Hind3双酶切pet28a(+)质粒,跑电泳切下目的带,用takara胶回收试剂盒回收酶切片段,回收后跑电泳,竟然什么也没有.回收之前量还可以啊,重复了好几次都 PBI121双酶切后回收不出来什么原因我用的酶切位点是BamH1和Sac1,切开之后带的亮度还可以,中孔的电泳我把三块胶切下来放一个管里回收的,回收试剂盒也是新的,我最后一般用30微升洗脱,但是回 我用EcoR1和BamH1一步双酶切pcDNA3.1+,为什么出来这样的图图一图二图一中前两个是原质粒,后面是酶切跑胶.80V120min图二是同样的,只是之前一天做的.不知道问什么条带那么丑,还有一点歪.麻烦高 为什么用IPTG诱导蛋白没表达?双酶切及PCR验证目的片段连到表达载体pET28a上了(所用的内切酶是BamH1,Hind111).重组质粒转化BL21,试了不同的IPTG浓度,诱导温度,就是没蛋白表达.后来重组质粒转化JM10 生化实验做了质粒DNA的双酶切,实验用的是BamH1 和EcoR1 .实验老师课上还讲了结果.但是不让拷ppt.我们做出来的图好像有三条带子.想知道那三条分别是什么?有一个700多bp, 定 的BAMH1 的酶切试剂不能进行酶切是什么原因 ? 从细胞中提取总的MRNA,然后进行RT-PCR,为什么可以设计相应的引物就可以获取含Ecor1和BamH1酶切位点的相应 质粒和目的基因片段分别双酶切（bamh1,xba1）连接后电转感受态细胞,同时将质粒酶切回收的片段转化做对照质粒和目的基因片段分别双酶切（bamh1,xba1）连接后电转感受态细胞,同时做对照：质